广林九号桉叶精油的提取及其生物活性研究

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广林九号桉(Eucalyptus urophylla×E.grandis,(Guanglin9)),具有速生、干直、耐寒等优良特性,是广西特别是桂中、桂北地区桉树人工林的主导树种。本文研究了广林九号桉叶精油的抑菌、抗氧化及对蚊虫的驱避作用等生物活性,同时研究了蒸馏时间对广林九号桉叶精油的化学成分及生物活性的影响。(1)采用滤纸片法和平板稀释法测定了广林九号桉叶精油对黄曲霉、橘青霉、黑曲霉、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌等6种供试微生物的抑菌活性。广林九号桉叶精油对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、黄曲霉、黑曲霉和橘青霉均有一定的抑菌活性。精油对供试细菌的最小抑菌浓度范围为10mL/L20mL/L,抑菌圈直径范围为9.5mm16.8mm。其中,精油对金黄色葡萄球菌抑制作用最强,其最小抑菌浓度为10mL/L。精油对霉菌供试菌种的最小抑菌浓度范围为5mL/L10mL/L,对黄曲霉、黑曲霉和橘青霉的抑菌圈直径分别为9.7mm、11.7mm和17.5mm。在霉菌中,精油对橘青霉的抑菌能力最强,其最小抑菌浓度为5mL/L。通过对比说明精油对霉菌的抑制能力比对细菌的抑制能力强。(2)以DPPH·自由基清除法测定了广林九号桉叶精油抗氧化能力,广林九号桉叶精油对DPPH具有一定的清除能力,其IC50为17.66mg/mL。在精油的主要成分中,α-蒎烯的IC50最小为5.00mg/mL,β-蒎烯次之为77.18mg/mL,1,8-桉叶油素的最高为241.0mg/mL,说明精油中α-蒎烯的抗氧化能力最强,β-蒎烯次之,1,8-桉叶油素的抗氧化能力最差。(3)参照中华人民共和国国家标准《农药登记用卫生杀虫剂室内药效试验及评价第9部分:驱避剂》(GB/T13917.9-2009),研究了广林九号桉叶精油对致乏库蚊的驱避作用,当精油的浓度分别为12.5%、25.0%和50.0%时,广林九号桉叶精油对人体有效保护时间分别为7.5min、30min和135min。(4)在广林九号桉叶油的提取过程中根据桉叶油的使用方向进行分割,提取了在总蒸馏时间为1h时,蒸馏时间段分别为010min、1060min的精油。010min馏段精油的提取率为0.28mL/100g,1060min馏段精油的提取率为0.34mL/100g。二者的化学成分相差较大,其中010min馏段精油中1,8-桉叶油素的含量为54.892%,1060min馏段精油中1,8-桉叶油素含量为34.506%。(5)广林九号桉叶1060min馏段精油的抑菌、抗氧化及对致乏库蚊的驱避活性都略强于010min馏段精油。010min馏段精油对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、黑曲霉、橘青霉、黄曲霉等测试菌的抑菌圈直径分别为12.9mm、10.1mm、8.4mm、11.1mm、9.7mm、8.5mm,1060min馏段精油对测试菌的抑菌圈直径分别为14.0mm、13.4mm、8.6mm、14.9mm、10.5mm、9.0mm。010min馏段精油和1060min馏段精油对测试菌的最小抑菌浓度均为540mL/L。1060min馏段精油清除DPPH·自由基的能力要明显强于010min馏段精油,其IC50值为16.74mg/mL仅为010min馏段精油的三分之一(49.87mg/mL),这可能与精油中的α-蒎烯的含量相关。当精油浓度为12.5%时,010min馏段精油和1060min馏段精油对致乏库蚊均不具备驱避效果;当精油浓度为25.0%时,010min馏段精油对人体的保护时间为48min,1060min馏段精油对人体的保护时间为60min;当精油浓度达到50.0%时,010min馏段精油对人体的保护时间为143min,1060min馏段精油对人体的保护时间为180min。
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