夹脊电针结合神经松动术对兔坐骨神经损伤后下肢运动功能以及Ras相关C3肉毒素底物1的mRNA和蛋白表达的影响

来源 :黑龙江中医药大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:yongren803
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目的:通过观察夹脊电针结合神经松动术对兔坐骨神经卡压损伤后下肢运动功能及Ras相关C3肉毒素底物1基因及蛋白、F-actin表达的影响,探讨夹脊电针结合神经松动术对兔坐骨神经损伤后轴突再生调控的相关机制,从而为夹脊电针结合神经松动术治疗周围神经损伤提供理论依据。方法:采用随机数表法将180只新西兰家兔分为正常对照组、模型对照组、夹脊电针组、神经松动术组、夹脊电针结合神经松动术组。每组36只,再按取材时间点分为治疗1周、2周、4周后共3个亚组,每个亚组12只新西兰家兔。模型对照组、夹脊电针组、神经松动术组、夹脊电针结合神经松动术组均采用钳夹法造成坐骨神经损伤模型,正常对照组、模型对照组不做任何干预,神经松动术组行神经松动术治疗,夹脊电针组进行夹脊电针治疗,夹脊电针结合神经松动术组进行夹脊电针和神经松动术治疗。于治疗1、2、4周后采用趾张反射评分和改良的Tarlov评分评定5组新西兰家兔的下肢功能恢复情况。并于治疗1、2、4周后,每组均抽取12只新西兰家兔安乐死后取坐骨神经和相应节段脊髓(脊柱L4-L6段),采用聚合酶链反应检测和免疫印迹检测Ras相关C3肉毒素底物1 mRNA及蛋白的表达,免疫荧光染色检测节段脊髓中F-actin表达。结果:(1)行为学评分:治疗1、2、4周后,夹脊电针组、神经松动术组和夹脊电针结合神经松动术组新西兰家兔的坐骨神经功能均优于模型对照组同时间点,差异均有统计学意义(P<0.05),但均低于正常对照组同时间点,差异均有统计学意义(P<0.01);且夹脊电针结合神经松动术组各时间点的坐骨神经功能均优于夹脊电针组和神经松动术组同时间点,差异均有统计学意义(P<0.05);(2)PCR灰度分析:治疗1、2、4周后,夹脊电针组、神经松动术组和夹脊电针结合神经松动术组节段脊髓和坐骨神经中Ras相关C3肉毒素底物1mRNA的表达量均高于模型对照组同时间点,但均低于正常对照组同时间点,差异均有统计学意义(P<0.01),且夹脊电针结合神经松动术组节段脊髓和坐骨神经中Ras相关C3肉毒素底物1mRNA的表达量高于夹脊电针组和神经松动术组同时间点,差异均有统计学意义(P<0.01);(3)Western blot灰度分析:相应节段脊髓比较,治疗1、2、4周后,夹脊电针组、神经松动术组和夹脊电针结合神经松动术组节段脊髓Ras相关C3肉毒素底物1蛋白的表达量均高于模型对照组同时间点,但均低于正常对照组同时间点,差异均有统计学意义(P<0.01)。治疗1周后,夹脊电针结合神经松动术组节段脊髓Ras相关C3肉毒素底物1蛋白的表达量显著高于夹脊电针组,差异有统计学意义(P<0.01)。治疗2、4周后,夹脊电针结合神经松动术组节段脊髓Ras相关C3肉毒素底物1蛋白的表达量显著高于夹脊电针组和神经松动术组同时间点,差异均有统计学意义(P<0.01);损伤的坐骨神经:治疗1周后,夹脊电针组、神经松动术组和夹脊电针结合神经松动术组坐骨神经中Ras相关C3肉毒素底物1蛋白的表达量均低于模型对照组和正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。治疗2、4周后,夹脊电针组、神经松动术组和夹脊电针结合神经松动术组坐骨神经中Ras相关C3肉毒素底物1蛋白的表达量均高于模型对照组同时间点,低于正常对照组同时间点,差异均有统计学意义(P<0.01),且夹脊电针结合神经松动术组坐骨神经中Ras相关C3肉毒素底物1蛋白的表达量显著高于夹脊电针组和神经松动术组同时间点,差异均有统计学意义(P<0.01);(4)免疫荧光蛋白染色分析:治疗1、2、4周后,夹脊电针组、神经松动术组和夹脊电针结合神经松动术组节段脊髓中F-actin的表达量均高于模型对照组同时间点,低于正常对照组4周时间点,差异均有统计学意义(P<0.01),且夹脊电针结合神经松动术组节段脊髓中F-actin表达量显著高于夹脊电针组和神经松动术组同时间点,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:夹脊电针结合神经松动术治疗可促进坐骨神经损伤后轴突再生的作用,其作用机制可能与上调损伤的坐骨神经和相应脊髓节段Ras相关C3肉毒素底物1基因、蛋白及相应节段脊髓F-actin的表达有关。
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