目的本研究拟利用胰腺癌Mia-paca2细胞进行放射敏感性研究,验证PHD3通过调节HIF-1α影响胰腺癌增殖及辐射敏感性,为胰腺癌放射增敏治疗提供新思路和基础医学实验依据。方法选取胰腺癌Mia-paca2细胞作为研究对象,首先利用过表达PHD3慢病毒,收集慢病毒颗粒用以感染胰腺癌Mia-paca2细胞,构建PHD3过表达Mia-paca2细胞株。将细胞分为四组:对照组,过表达PHD3组,单独照射组,过表达PHD3+照射组。随后分别在常氧（20%O₂）及乏氧环境（1%O₂）下进行细胞培养,照射组细胞给予单次2Gy 6MV-X线照射。蛋白质免疫印迹法检测常氧及乏氧培养条件下,PHD3、EGFR、p-EGFR、HIF-1α在蛋白水平上的表达;通过集落形成实验对上述各组细胞的克隆形成情况进行检测;流式细胞术检测PHD3对X线照射后胰腺癌Mia-paca2细胞周期分布及对细胞凋亡的影响。结果在常氧及乏氧培养条件下感染过表达PHD3慢病毒颗粒后,胰腺癌Mia-paca2细胞中PHD3表达较对照组明显增高,而HIF-1α和p-EGFR表达随着PHD3表达增加而减少（P=0.0065,P=0.0157,P=0.0001,P=0.0003）,经过2Gy照射后,HIF-1α和p-EGFR表达进一步减少（P=0.0002,P=0.0007,P<0.0001,P<0.0001）;集落形成实验显示,给予过表达PHD3组Mia-paca2细胞剂量梯度递增X线照射后,细胞存活分数随着照射剂量的增大而逐渐减小（P<0.0001）;凋亡实验结果显示,与对照组细胞相比,PHD3过表达组Mia-paca2细胞经2Gy X线照射,细胞凋亡比例明显增多（P<0.0001）,而在乏氧环境中细胞凋亡比例增多更为显著（P<0.0001）。细胞周期检测结果表明,在常氧环境及乏氧环境中过表达PHD3组Mia-paca2细胞经2Gy X线照射后,细胞周期S期缩短而G2/M期出现了延长,从而使细胞停滞在对放射线反应较敏感的G2/M期。结论我们通过研究发现,过表达PHD3蛋白能够抑制HIF-1α的表达并影响EGFR的功能。同时过表达PHD3联合放射线照射能够明显促进Mia-Paca2细胞在乏氧环境内的发生凋亡,降低存活分数,使细胞停滞在对放射线反应较敏感的G2/M期,提示PHD3可作为提高胰腺癌细胞放射敏感性的新型靶标。