目的:骨髓微环境不仅支持正常造血细胞的生长和分化,而且有助于肿瘤细胞的生长,它在肿瘤细胞的增生、分化、凋亡中起着重要作用。LTD4是存在于骨髓微环境中的细胞因子,它对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制目前还不清楚。本实验以慢性粒细胞白血病K562细胞为研究对象,研究骨髓微环境中LTD4对K562细胞增殖和凋亡的影响,为寻找通过改造白血病骨髓微环境逆转细胞耐药治疗白血病的新的治疗方法提供理论基础。方法:1.收集6例正常人及6例白血病患者骨髓标本,分离骨髓单个核细胞,培养骨髓基质细胞,ELISA法检测骨髓基质细胞培养上清中LTD4含量。2.体外培养人白血病K562细胞,采用不同浓度LTD4处理K562细胞,培养48小时,CCK-8法检测K562细胞的增殖活性,AnnexinV/PI双染色法检测K562细胞的凋亡效应, RT-PCR方法检测相关基因mRNA的表达及变化。结果: 1. ELISA检测结果显示,白血病基质细胞培养上清中LTD4平均含量为( 1684.5±185.1 ) pg/ml,而正常基质细胞培养上清中LTD4的含量为(1192.5±89.6)pg/ml,明显低于前者(P<0.05)。2. CCK-8和AnnexinV-FITC/PI双染结果显示,LTD4可促进K562细胞增殖并抑制其凋亡,且随剂量的增加效果增强。RT-PCR结果显示,K562细胞有CysLT受体表达,LTD4可使CysLT受体基因表达增加,且随LTD4浓度增加CysLT受体mRNA表达量增加。结论:1.体外培养的骨髓基质细胞能分泌相当量的LTD4,在白血病基质细胞尤为显著,提示LTD4的高分泌与形成白血病骨髓微环境的功能异常有关。2.在K562细胞中表达CysLT受体分子,LTD4通过CysLT受体刺激K562细胞增殖。