论文部分内容阅读
香茅草是禾本科香茅属多年生草本植物,是一种重要的热带香料作物和药用植物,其挥发性产物主要以萜烯化合物为主,是香料生产的主要原料之一。然而,香茅草种植规模深受农耕面积,环境气候和病害的制约,而且常规提取手段获得的萜烯化合物含量较低,难以满足市场需求,生物合成方法(主要是微生物合成)逐步成为萜烯化合物合成的研究热点。药用植物能够合成大量丰富的天然代谢产物,内生菌长期内生于其中,具有独特的新陈代谢过程,很可能会具备与宿主植株相似次生代谢的潜能。开发药用植物内生菌资源,将会为天然产物的合成提供新方案。通过植物表面消毒结合四种分离培养基(WA、TWYE、MS、TSA)的方法,从成熟香茅草中分离出一批内生细菌,根据感官评定初步筛选出36株产香内生细菌,从中选择一株具有明显清新愉悦香味的内生细菌CcSh-1。根据形态学、生理生化和16S rRNA序列分析,鉴定该菌株为菠萝泛菌(Pantoea ananatis)。利用顶空气相色谱质谱联用仪技术,对香茅草和内生细菌CcSh-1挥发性成分进行鉴定,得出香茅草挥发性成分为α-蒎烯、1s-α-蒎烯、3-蒈烯、艾蒿醚、2,2-二甲基-3,4-辛二烯、橙花醛和香叶醛;CcSh-1的挥发性成分为莰烯,α-蒎烯,檀香三烯,橙花醛,香叶醛和白檀油烯醇,其中以柠檬醛(橙花醛和香叶醛)含量较高,为2.1μg/mL。对香茅草及CcSh-1共有的挥发性成分为:α-蒎烯、橙花醛和香叶醛,并且柠檬醛(橙花醛和香叶醛)的含量均相对较高。文章初步探究了CcSh-1产香的最佳培养条件。综合考察CcSh-1在液体培养条件下的产香效果和生长状况,初步确定CcSh-1的最适宜的培养条件为:以牛肉膏为碳源,蛋白胨为氮源,温度30℃,pH7,此时CcSh-1的生长状况最好,产香最优。通过在培养基中加入1%(w/v)香茅草粉末,发现CcSh-1的挥发性成分种类不会发生变化,但其柠檬醛含量有明显提高。总之,本文筛选得到了一株具有明显清新愉悦香味的内生细菌CcSh-1,经鉴定和分析,确定其挥发性组分包含以柠檬醛为主的萜类化合物,初步建立了CcSh-1的最优产香条件,本文还探究了香茅草对CcSh-1产香的影响,体现了内生菌与其宿主间存在相互作用。