基于上转换荧光纳米材料免疫层析法快速检测肌红蛋白及降钙素原的研究

来源 :广州医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:wyitzl
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自上转换发光现象被发现以来,由于其优良的光学特性和巨大的应用前景,吸引着众多学者进行研究。上转换发光是基于双光子或多光子过程,发光中心相继吸收两个或者多个光子,经过无辐射弛豫达到发光能级,从而跃迁至基态产生短波长光子,即在长波长的激发光激发下发射出短波长的发射光,发射光子的能量高于激发光子的能量,是一种反斯托克斯发光。上转换纳米材料作为一种新型生物荧光标记物,具有特殊的性质,如光化学稳定、发射谱带窄、荧光背景低、无光漂白等优点。另外最大的优点在于以红外光作为激发光源,组织穿透能力强,对组织损伤小,在生物定量检测和生物活体成像检测方面具有极大的应用前景。上转换荧光纳米材料主要包括基质、敏化剂和激活剂,氟化物NaYF4被认为是上转换效率最高的基质材料,Yb3+由于能级结构比较简单且吸收截面较大因此被选为敏化剂,激活剂主要有Er3+、Tm3+、HO3+、Pr3+等,每种激活剂离子均有其独特的发光特性。本论文实验中,主要包括两部分,第一部分是基于上转换荧光颗粒NaYF4:Yb3+,Er3+@NaLuF4免疫层析法快速检测肌红蛋白。其中采用热分解法分别合成了形貌均一、六方相的NaYF4:Yb3+,Er3+、NaYF4:Yb3+,Er3+@NaYF4和NaYF4:Yb3+,Er3+@NaLu F4这三种不同的颗粒,核壳颗粒NaYF4:Yb3+,Er3+@NaYF4和NaYF4:Yb3+,Er3+@NaLu F4的发光强度是裸核颗粒NaYF4:Yb3+,Er3+的25倍,最后选用NaYF4:Yb3+,Er3+@NaL uF4与肌红蛋白抗体偶联,对临床血清样品进行检测。建立了线性回归方程为y=0.00157x+0.0314(R2=0.98916)的标准曲线,线性范围为0.5 ng/ml-400 ng/ml,空白限、检测限和定量限分别为:0.1 ng/ml、0.5 ng/ml和0.5 ng/ml。测定血清肌红蛋白(Mb)可作为急性心肌梗死(AMI)诊断的早期最灵敏的指标,是早期排除AMI诊断的重要指标,如Mb阴性,则基本排除心肌梗死。Mb还可用于再梗死的诊断,结合临床表现,如Mb重新升高,可考虑为再梗死或者梗死延展。第二部分为基于上转换荧光纳米颗粒NaYF4:Yb3+,Tm3+@NaYF4结合免疫层析法快速检测降钙素原(PCT)。实验中采用热分解法合成形貌均一、六方相核壳颗粒NaYF4:Yb3+,Tm3+@NaYF4和裸核颗粒NaY F4:Yb3+,Tm3+,其中核壳结构的NaYF4:Yb3+,Tm3+@NaYF4是裸核颗粒NaYF4:Yb3+,Tm3+荧光强度的4倍,最后选用核壳颗粒NaYF4:Yb3+,Tm3+@NaYF4与PCT抗体偶联,对临床血清样品进行检测。建立了线性回归方程为y=(50.16053-0.04349)/[1+(x/187.45781)-0.98639]+0.04349(R2=0.99185)的标准曲线,线性范围为0.05 ng/ml-50 ng/ml,空白限、检测限和定量限分别为:0.02 ng/ml、0.03 ng/ml和0.05 ng/ml。PCT是一种糖蛋白,当严重细菌、真菌、寄生虫感染以及脓毒症和多脏器功能衰竭时它在血浆中的水平升高,主要反应全身炎症反应的活跃程度。
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