纤维素是地球上最丰富的碳水化合物质，可被纤维素酶转化成为葡萄糖。具有很大的开发前景。纤维素酶因其在整个领域潜在的应用价值而倍受关注，它可以用于纤维废物的生物转化，可以用于纺织、造纸、洗涤、饲料加工等工业领域，还可以用于酵母和丝状真菌的原生质体制备，进行菌株改良。传统上采用化学方法控制纤维素降解难度大、成本高，对环境污染严重，而纤维素的生物降解有效克服了这些问题，不但提高了资源利用效率，而且增加了经济效益。 嗜热真菌产生的纤维素酶在高温条件下具有高活力和稳定性，并且与中温真菌一样，嗜热真菌产生的各类纤维素酶普遍含有多种类型的组分。嗜热毛壳菌(ChaetomiumthermophilumCT2)是一种广泛分布的，生长上限温度较高的一种嗜热真菌，从该菌中已分离了多种嗜热酶，并且证明了其纤维素酶存在多个组分。本研究中C.thermophilumCT2在以乳糖为唯一碳源的合成培养基中诱导产生胞外纤维素酶，通过通过硫酸铵沉淀、Phenyl-Sepharose疏水层析、DEAE-SepharoseFastFlow阴离子层析等步骤获得了凝胶电泳均一的内切β-葡聚糖酶。SDS-PAGE测得所分离纯化酶蛋白的分子量约为30kDa。同时对该酶进行理化性质的研究。 C.thermophilumCT2内切β-葡聚糖酶的N-端15个氨基酸序列为MNQLEVLSLQSMPAA，与其它已报道纤维素酶的N-端氨基酸序列同源性比较低，推测可能是一种新的内切纤维素酶组分。 根据纤维二糖水解酶的氨基酸同源保守序列设计简并引物，克隆了C.thermophilumCT2热稳定纤维二糖水解酶cbh2基因，随后提取基因组DNA,克隆了其DNA序列，该序列长1950bp，包含三个内含子区域。该基因在GenBank中注册号为DQ020255。将cbh2基因与酵母表达载体pPIC9KEcoRⅠ和NotⅠ双酶切后体外连接构建了酵母分泌型表达载体pPIC9K/cbh2，转化巴斯德毕赤酵母获得了转酵母工程菌PGS-D，表达蛋白达到1.5mg/mL，同时对重纤维二糖水解酶CBHⅡ的性质进行了研究。 同时根据真菌纤维二糖水解酶序列，分析比较筛选出一对引物，扩增纤维二糖水解酶(cbh1)基因，将该基因与酵母表达载体pPIC9KEcoRⅠ和NotⅠ双酶切后体外连接构建酵母分泌型表达载体pPIC9K/cbh1，重组质粒线性化后转化毕赤酵母GS115感受态细胞，获得了转酵母工程菌PGS-H，经甲醇诱导获得了重组纤维二糖水解酶CBHⅠ，表达量达1.42mg/mL。