心理应激诱发抑郁大鼠前额叶皮质DRD1-DRD5,DAT表达的mi-RNA调控机制

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目的:研究早期母爱剥夺应激和成年慢性不可预知性应激对SD大鼠行为、前额叶皮质DRD1-DRD5mRNA,DATmRNA及蛋白质表达的影响及mi-RNA的调控机制。方法:将新生SD雄性大鼠随机分为母爱剥夺应激组(MD)、慢性不可预知性应激组(CUS)和正常对照组(C)。MD组大鼠接受母爱剥夺应激,CUS组大鼠在成年后接受慢性不可预知性应激,对照组不接受任何实验处理。采用强迫游泳实验、糖水偏爱实验和旷场试验评估大鼠焦虑、抑郁样行为。采用实时定量荧光PCR检测前额叶皮质内DRD1-DRD5, DATmRNA和miR-16、miR-200a、miR-207、miR-22、 miR-122、miR-96的表达水平;采用免疫印迹法检测前额叶皮质DRD1-DRD5, DAT蛋白质表达水平。结果:1.行为学结果:与对照组比较,MD及CUS组大鼠静止漂浮时间增加,糖水偏爱率降低,直立次数减少、大便颗粒数增加(P<0.05);与CUS组比,MD组大鼠静止漂浮时间长,糖水偏爱率降低(P<0.05)。2.蛋白表达检测结果:与C组比较,MD组的DRD1、 DRD5、DRD3、DRD4、DAT及CUS组的DRD1、DRD5、DAT、DRD2蛋白质表达上调(P<0.05)。与CUS组比较,DRD5蛋白质表达下调,D2样受体及DAT蛋白质表达下调(P<0.05)。3.基因表达检测结果:与C组比较,MD组DRD1、DRD5mRNA、DRD3、DRD4、DATmRNA及CUS组的DRD1、DRD5、DRD2、DATmRNA表达上调,与CUS比较,D1样受体、D2样受体及DAT蛋白质表达上调。4.mi-RNA表达检测结果:与C组比较,MD组的miR-207,miR-96的表达降低(P<0.05),CUS组的miR-122、miR-22,miR-207表达增加(P<0.05)。miR-22、miR-122、miR-96表达水平分别与DRD、DRD5、DAT蛋白表达水平明显相关(P<0.05)。5.生物学指标与行为学指标相关结果:DRD1蛋白表达水平与糖水偏爱率相关显著(P<0.05); DRD1、 DRD5,DAT蛋白表达水平与静止漂浮时间明显相关(P<0.01);DRD5、DAT与直立次数相关(P<0.05);DRD1、DRD5, DAT蛋白表达水平与中央格比例相关(P<0.01)。结论:1.不同应激范式可诱发大鼠不同的抑郁样表型。2.不同抑郁表型大鼠前额叶皮质内多巴胺受体、转运体发生差异性的改变。3.miRNA可能参与不同抑郁亚型的发生机制。
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