【摘 要】
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为了研究Sry基因的调控网络，采用siRNA技术使Sry基因沉默，探讨了有效沉默Sry基因的途径和最佳条件。 我们设计、合成针对小鼠Sry基因的发夹状寡核苷酸链，退火后连入真核表达
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为了研究Sry基因的调控网络，采用siRNA技术使Sry基因沉默，探讨了有效沉默Sry基因的途径和最佳条件。
我们设计、合成针对小鼠Sry基因的发夹状寡核苷酸链，退火后连入真核表达载体pSilencer4.1-CMVneovector，构建以小鼠Sry基因为靶点的siRNA干涉载体pSilencer4.1/Sry217及pSilencer4.1/Sry565，通过尾静脉注射法将载体质粒导入妊娠小鼠体内，于小鼠妊娠第11.5天，即11.5dpc(dayspostcoitum，性交后天数)取出胚胎，采用双重PCR法对胚胎进行性别鉴定，鉴定为雄性的胚胎采用半定量RT-PCR法检测Sry基因的表达量，研究不同干扰序列、不同注射时间及注射剂量对Sry基因表达量的影响。
研究结果，确定了质粒的最佳注射时间为9.5dpc，注射剂量为20μg，注射干扰质粒pSilencer4.1/Sry565对Sry基因的抑制效率达85％左右。表明：siRNA可以显著抑制雄性胚胎Sry基因的表达。
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