肾细胞癌(renal cell carcinoma,Rcc)是泌尿外科最常见的恶性肿瘤,近年来其发病率有逐渐增高的趋势,随影像学检查技术的进步,早期非转移性肾癌比例增高。根治手术仍是首选治疗方案,但术后有复发和转移的可能,大约40-70%的患者术后会出现肿瘤远处扩散。长期的临床实践发现传统的放疗、化疗和激素治疗对于肿瘤复发转移的治疗和预防效果不佳。RCC具有免疫源性。目前研究发现生物治疗效果较好,并可提高生存率。机体抗肿瘤效应主要是细胞介导的细胞免疫,因而细胞免疫的状态直接反映机体抗肿瘤免疫机能。常作为肿瘤患者术后预后的重要指标。CD4+细胞为T辅助细胞亚群,其既可产生IL-2、INF等细胞因子介导效应细胞的细胞毒反应和吞噬功能,又可辅助B细胞产生抗体而参与体液免疫,CD8+细胞系T杀伤细胞/抑制细胞亚群,是机体抗肿瘤的主要效应细胞。因此监测外周血T细胞亚群的变化可作为反映机体肿瘤免疫能力的一个指标。在化疗-免疫治疗中,早期外周血CD4+/ CD8+淋巴细胞比值升高是一项独立的强预后因子。另外,C反应蛋白C-reactive protein(CRP)在肿瘤浸润时血浆中水平将迅速显著地升高,且随疾病的转归而呈不同程度下降,其作用与上调巨噬细胞、TNF-а及MCP-1水平有关,故结合临床可用于RCC的辅助诊断、病情活动性评估和治疗判断,是RCC的一项独立预后因子。CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞(Treg)是具有特定表型和抑制功能的T细胞淋巴亚群,可通过多种方式抑制抗肿瘤免疫从启动到疗效的整个阶段,在肿瘤逃逸中起者重要作用。肿瘤患者体内调节性T细胞增多,不仅是一个普遍现象,而且对预后及疗效评价等方面具有指导意义,是免疫治疗的新的有效靶点。此类研究对于临床肾癌术后的生物治疗有现实的指导意义。本课题通过了解干扰素а(INF-а)、白细胞介素(2IL-2)和5氟尿嘧啶(5-FU)联合应用于肾癌根治性切除术后患者,观察治疗前后淋巴细胞亚群包括其中调节性T细胞的变化及血浆中CRP水平的改变,进而了解生物治疗对于肾癌治疗的疗效。由于病例采集分布在多家医院,故属于多中心自体前后对照前瞻性研究。主要研究方法及结果如下:1对象选取选取白求恩国际和平医院泌尿外科、河北医科大学附属第四医院泌尿外科两个临床试验中心,自2007年1月1日起从住院行肾肿瘤切除术的患者中选取术前经超声、CT、MRI检查,明确诊断单侧肾占位性病变,标本例数30例。其中男性17例,女性13例,年龄18-78岁,平均60.3岁。术后病理报告均为肾透明细胞癌。AJCC分期为:Ⅰ期(T1aN0M0)2例,Ⅱ期(T2N0M0)15例,Ⅲ(T3N0M0)期10例,Ⅳ期( (T4N2 M0)1例,(T4N2 M1)) 2例)3例。瘤体直径1.8～16cm ,平均6.7cm。2综合治疗方法2.1根治性肾切除术:切除范围包括肾周筋膜、肾周脂肪、肾、肾周淋巴结,同侧肾上腺、上1/ 2输尿管;2.2保留肾单位的肿瘤剜除术:阻断肾蒂后切除距离病变部位1.0cm范围的肾组织,再将残存肾单位缝合止血后,去除阻断。控制阻断时间<15min;2.3免疫化疗:术后1周切口愈合后开始按以下方案开始行免疫治疗该方案周期8周,间隔3个月可重复进行。每个治疗周期中。IFN-α总剂量72MIU ,IL-2总剂量126MIU,5-FU总剂量4.0g。2.3术后每月复查血常规、肝肾功能、肝和肾B超、胸部及骨X线。治疗期间根据患者病情行相应对症治疗。3观察指标及统计学分析分别设患者手术前一周内,术后一周及应用免疫治疗一疗程(8周)后为3个观察点。3.1分别取患者在3个观察点的外周静脉全血3ml经散射比浊法测定CRP值作为自体前后对照变量;3.2分别取患者在3个观察点的外周静脉EDTA-Na2抗凝全血1ml经流式细胞仪行T淋巴细胞及其亚群免疫标记,记录患者的CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+T细胞值等数据作为自体前后对照变量;3.3分别取患者在3个观察点的外周静脉EDTA抗凝全血1ml经流式细胞仪行CD4+CD25+T淋巴细胞(Treg细胞)数作为自体前后对照变量。统计学分析:变量分布的分析、配对资料的t检验,或Wilcoxon检验。4结果:该研究显示30例明确诊断的RCC患者经过综合治疗共9w后外周血CRP水平较治疗前有明显降低;外周血T淋巴细胞亚群中CD3+水平在治疗后明显升高,CD3+CD4+ T细胞变化不明显,CD3+CD8+ T细胞呈下降性变化,CD4+/CD8+值明显升高;Treg细胞明显降低。本研究通过观察RCC患者在综合治疗前后的外周血生化指标及淋巴细胞亚群的变化揭示干扰素а(INF-а)、白细胞介素2(IL-2)和5-FU联合应用于肾癌根治性切除术后患者,其应用前后免疫功能及CRP的变化存在明显差异性,通过分析可以总结出生物治疗对肾癌患者治疗的有效性,从而可为临床治疗提供指导。