论文部分内容阅读
增生性瘢痕(Hypertrophic Scars,HTS)治疗方法多种多样,药物注射治疗HTS是一种重要的临床治疗办法。A型肉毒毒素(Botulinum Toxin Type A,BTXA)是近年来研究与应用热点,作为一种神经毒素,临床适用范围不断扩展,深入临床各个学科领域。包括BTXA应用于疼痛学科、治疗前列腺良性增生、促腺细胞凋亡及对神经肽P物质的抑制等作用机理均给我们以提示,对HTS可能具有预防、抑制组织异常增生,缓解临床症状的作用,本课题在以往研究的基础上探索BTXA对早期HTS的预防及治疗效果,以期扩展HTS的治疗空间以及BTXA的应用前景。本研究分为两个部分:第一部分,临床早期HTS患者瘢痕组织内及围绕瘢痕真皮下注射BTXA,观察注射后瘢痕形态学变化及患者的临床主诉、症状与体征;利用HE染色对HTS组织切片行常规病理观察瘢痕组织学的变化;同时,条索状HTS利用手术切除后,切口缝合即刻周围真皮下及肌肉浅层注射BTXA,观察一年内切口瘢痕愈合情况。第二部分,为进一步探索BTXA对HTS作用机理,体外培养人HTS成纤维细胞,观察BTXA对成纤维细胞生物学性状改变及细胞周期变化的影响,以期指导临床治疗。实验室培养人HTS成纤维细胞,分组后在浓度50U/1ml BTXA孵育作用下,光镜观察成纤维细胞形态学变化;72小时后收集细胞,应用流式细胞技术(FCM)检测成纤维细胞的细胞周期及凋亡情况并与对照组对比,进行统计学检验;同时利用透射电镜(TEM)检测细胞内超微结构的变化。研究结果显示局部注射BTXA可以明显减轻早期HTS患者疼痛和瘙痒症状,促使HTS发生萎缩、软化;组织切片HE染色显示给药HTS组织结构发生一定变化。手术切口缝合后真皮下及肌肉浅层浸润注射BTXA,可以预防术后切口瘢痕增生的发生发展,改善瘢痕愈合效果。实验室中浓度50U/1ml BTXA可以诱导体外培养的人HTS成纤维细胞光镜下发生生物学变化,同时通过流式技术检测到细胞发生不同时期凋亡现象,HTS成纤维细胞对照组与BTXA组凋亡率差别比较具有统计学意义(P＜0.05)。透射电镜相应观察到部分凋亡细胞的典型超微结构变化。以上结果表明BTXA对早期HTS具有一定程度的治疗作用,同时对手术术后切口的瘢痕愈合具有一定程度预防增生作用。其作用机理可能是通过降低瘢痕两侧张力及活动、麻痹瘢痕内小神经传导,抑制神经肽P物质的释放,促进成纤维细胞凋亡,从而减少胶原分泌与合成,促进瘢痕萎缩来实现的,BTXA对HTS的治疗前景有待进一步研究探讨。