基于毛细管电泳的用于三磷酸腺苷检测的氧化石墨烯-适配体传感器

来源 :华中科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lixuantea
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
作为一种新型的荧光纳米材料,量子点具有传统有机荧光染料所不具备的一些独特的光学性质,因此近年来,量子点被广泛关注。它在荧光探针、细胞标记、生物传感器、医学影像等多个领域都有广泛的应用。基于此,本文将量子点表面修饰上对ATP具有特异性识别和结合能力的适配体,并利用适配体与氧化石墨烯(GO)之间强的吸附作用和氧化石墨烯一起构建一个基于毛细管电泳的检测三磷酸腺苷的氧化石墨烯-适配体传感器,论文具体完成的工作如下:(1)用新制备的α-二氢硫辛酸通过配体置换的方式将油溶性量子点转换成水溶性量子点,并用EDC作偶联剂制备量子点-适配体荧光探针(QD-aptamer)。通过不同的方法对其进行了多种表征,如紫外-可见吸收光谱、荧光发射光谱,毛细管电泳、动态光散射、Zeta电位等。结果发现QD-aptamer的紫外-可见吸收光谱在260nm处出现明显吸收峰,并且该荧光探针的发射光谱相较于裸的量子点有5nm的红移,这可能是由于量子点与核酸适配体的连接导致颗粒尺寸变大的缘故,从动态光散射的结果中也可以得到相同的结论;从毛细管电泳图谱结果中我们可以发现在相同的条件下,不同样品的迁移时间出现了相应的变化,这些都说明我们成功制得了QD-aptamer。(2)将不同浓度的QD-aptamer与固定浓度的GO溶液混合,以确定固定浓度GO最大程度吸附QD-aptamer时该荧光探针的浓度。实验结果表明,当GO与QD-aptamer终浓度分别是0.1μg/mL和300nmol/L时,QD-aptamer的荧光可以被GO完全淬灭。(3)本文在确定GO最大吸附QD-aptamer荧光探针浓度后,向上述混合液中加入不同浓度的三磷酸腺苷(ATP)溶液,用毛细管电泳技术探究ATP浓度对探针的荧光恢复程度的影响。实验结果表明,ATP浓度在25-1500nmol/L范围内与荧光恢复强度存在良好的线性关系,R=0.9849,其检出限为10nmol/L。(4)本文利用该生物传感器对小鼠纤维细胞系NIH-3T3及人宫颈癌细胞系HeLa细胞中ATP的浓度进行了检测,其结果分别是0.31±0.32mmol/L,2.64±0.45mmol/L,并同时用商品化试剂盒检测了这两种细胞系中细胞内ATP的浓度,其结果分别是0.29±0.02mmol/L and2.28±0.05mmol/L。比对两种方法的检测结果,发现其检测结果与我们构建的体系的结果基本一致,这表明该方法在检测低浓度靶标分子时具有明显的优势和良好的实用性。
其他文献
鉴于微波频率高、信息容量大、能穿透电离层及适合远距离无线传输等优点,微波能量无线输电技术已成为当今世界研究的热点课题,其应用前景十分广阔。  本文在前人对接收整流天
心肌梗塞疾病是长期困扰医学界的难题,因为心肌坏死后不能再生,损伤心肌的修复是由成纤维细胞完成的.人们正在探索的干细胞移植技术,为病损心脏的细胞重建及衰竭心脏的功能恢
运载火箭在发射过程中所形成的发射环境,使发射塔架承受一定程度的激振,这会对发射塔架造成相应的损坏,随着火箭发射次数的增加,发射塔架遭受的损坏逐渐积累,这会使发射塔架
微生物菌种在发酵工业中至关重要,也有“发酵工业的灵魂”之称,因此,加强高产菌种的特性研究十分重要。高山被孢霉(Mortierella alpina,MA)被广泛应用于工业化生产具有重要生理活性
东亚飞蝗是我国重要农业害虫之一,对农业生产危害极其严重。在山西南部猖獗区每年发生两代,其灾变类型属于暴发性蝗灾。目前控制蝗虫仍以化学防治为主,由于大量使用化学农药,东亚