近年来,半滑舌鳎（Cynoglossus semilaevis）因其味道鲜美和极高的营养价值,越来越频繁地出现在人们的餐桌上,使得工厂化养殖半滑舌鳎的规模不断加大,病害也随之愈发严重,其中,创伤弧菌（Vibrio vulnificus）感染半滑舌鳎给养殖户带来了较大的经济损失。本论文在探究半滑舌鳎对创伤弧菌感染的免疫应答中运用了分子生物学、生理生化指标测定、显微病理学和超微病理学等方法,力求阐明其致病机理,为该病的有效防控提供基础理论支持,研究结果如下:一、半滑舌鳎的创伤弧菌人工感染试验及病原菌的分离鉴定。半滑舌鳎人工感染创伤弧菌后,食欲不振,不喜游动,但有时会突然浮出水面,绕圈狂游,在池中观察到大量白便。病鱼有眼侧整体脱鳞,表皮腐烂脱落,露出红色肌肉,形成溃疡口;无眼侧整体或鳍边充血发红,腹部肿胀,肛门红肿突出。解剖后可见鳃贫血,充满黏液,鳃丝末端腐烂;肠道充血,肠壁发红,肠粘膜脱落,肠内有大量积液和白便;脾脏颜色深且暗;胆囊颜色淡半透明;肾脏贫血颜色淡;肝脏发白,有糜烂现象。7日内,体长（29.75±2.63）cm,体重（116.21±7.34）g的半滑舌鳎腹腔注射1011cfu/mL剂量创伤弧菌死亡率高达100%,腹腔注射108cfu/mL剂量创伤弧菌死亡率高达90%,腹腔注射105cfu/mL剂量创伤弧菌死亡率高达40%,半致死浓度为4×105 cfu/mL。创伤弧菌对左氧氟沙星、氟苯尼考、头孢噻肟、庆大霉素、阿奇霉素等5种抗菌药物高度敏感。河北省唐山市盛茹水产养殖有限公司的一批半滑舌鳎爆发急性病害,临床症状与病理剖检结果与创伤弧菌感染半滑舌鳎相似,从典型患病的半滑舌鳎的肠道、肝脏、肾脏器官组织中得到了 1株优势菌BH01（优势度达到90%）。对菌株BH01进行BLAST同源性检索比对和系统发育树分析表明该菌株为创伤弧菌。二、创伤弧菌感染半滑舌鳎对血液生理生化指标的影响。梯度感染（高剂量:1011cfu/mL;中剂量:108cfu/mL;中剂量:105cfu/mL）后半滑舌鳎血液学统计的变化:血小板计数:高剂量组在24h、48h和72h三个时间点均高于对照组（P<0.05）。血红蛋白含量:各实验组之间无显著差异（P>0.05）。半滑舌鳎感染创伤弧菌后72h内,仅高剂量组的单核细胞、嗜中性粒细胞和嗜酸性粒细胞共同应对病原体感染,而低剂量组和中剂量组除了初始比例波动外,并无显著差异变化,对病原体感染不敏感。梯度感染后半滑舌鳎血清免疫指标的变化:72h内,低剂量组和中剂量组的大部分血清免疫指标与对照组相比无显著性差异。在24h时,仅高剂量组的碱性磷酸酶水平显著高于对照组（P<0.05）。在48h时,高剂量组的总补体、免疫球蛋白M和碱性磷酸酶水平达到最高,溶菌酶活性最低（P<0.05）;在72h时,所有血清免疫指标与对照组相比无显著差异（P>0.05）;血清超氧化物歧化酶和白细胞介素-1β水平在所有实验组中无显著差异。三、创伤弧菌感染半滑舌鳎对肝脏生理生化指标的影响。实验组肝脏碱性磷酸酶和超氧化物歧化酶整体高于对照组,但无显著差异（P>0.05）。溶菌酶活性:在24h时,高剂量组的溶菌酶活性显著低于对照组（P<0.05）。在48h时,高剂量组溶菌酶活性最低,但不显著;在72h时,高剂量组溶菌酶活性最低（P<0.05）。四、创伤弧菌感染半滑舌鳎对显微病理的影响。患病鱼肝细胞萎缩变性,细胞间隙增大,细胞核嗜碱性降低,肝组织萎缩,胰脏充血,外部有水泡样变性;肠道静脉充血,肠粘膜层与粘膜下层分离,肠绒毛萎缩,变性坏死,杯状细胞减少。鳃小片呼吸上皮细胞肿大变性增生,增生后变粗的鳃小片,使鳃丝呈“棍棒状”。鳃丝毛细血管扩张充血,鳃小片间可见大量的增生细胞。中肾细胞空泡,萎缩,肾小管上皮细胞坏死,细胞间没有清晰界限,只能看到肾小管大致轮廓,肾小球结构紊乱,肾小囊腔间隙增加,有大面积组织出血,崩解坏死现象。五、创伤弧菌感染半滑舌鳎对超微病理的影响。患病鱼的肝脏、肾脏和脾脏的超微结构发生了明显的病理变化。肝细胞萎缩,细胞之间有明显间隙,细胞核变形,核膜之间的界限变得模糊,甚至一些细胞核被挤压到细胞边缘处,偏离细胞中心,线粒体肿胀,一部分线粒体有溶解现象,内质网扩张,呈杂乱状,溶解的细胞器弥散于细胞核周围,部分肝细胞坏死、凋亡。溶酶体增加,自噬小泡形成,可见溶酶体与吞噬体结合。头肾细胞间界限模糊,细胞质内线粒体崩解,嵴断裂,有的线粒体溶解成空泡,内质网肿胀,排列紊乱,细胞核发生形变,核膜界限模糊。脾脏细胞核部分溶解,呈“镂空状”,有空泡,核膜界限模糊,细胞质内线粒体崩解,嵴背断裂,内质网肿胀断裂。