牡蛎ACE抑制肽的制备工艺及活性研究

来源 :大连海洋大学 | 被引量 : 7次 | 上传用户:kocis2815
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牡蛎资源丰富,营养价值高,其提取物具有降血压、降血糖和抗氧化等生物活性。本论文以牡蛎为研究对象,从牡蛎ACE抑制肽的制备、降血压活性、产物修饰以及中试生产这四个方面进行研究,主要研究结果如下:(1)以牡蛎为研究对象,按照预设工艺流程,以ACE抑制率为指标,优化出最佳制备牡蛎ACE抑制肽的工艺。结果表明:脱盐和预煮可以提高牡蛎多肽的ACE抑制率;二次酶解不仅能够提高牡蛎多肽的产率还可以提高ACE抑制活性;酶解液超滤后,分子量小于3KDa的牡蛎多肽的ACE抑制率更高。在最佳工艺下,对制备的牡蛎多肽进行基本成分和氨基酸含量的测定。结果表明:牡蛎ACE抑制肽的多肽含量为66.7%、糖分18.2%、灰分6.31%且17种氨基酸组成良好。(2)以小于3KDa的牡蛎ACE抑制肽为原料,对原发性高血压大鼠(Spontaneously Hyp ertensive Rat,SHR)进行灌胃试验(28 d),评价牡蛎ACE抑制肽的降血压作用。结果表明,牡蛎ACE抑制肽组除第2天外SHR心脏收缩压均明显低于空白组。第21天时SHR心脏收缩压降到最低为(161.56±16.63)mmHg,之后基本保持恒定且均极显著低于空白组(P<0.01);同时牡蛎ACE抑制肽在一定程度上能够抑制SHR体重的增长;采用ELISA测试盒对SHR血清中RAS系统和抗氧化系统相关指标进行测定,研究牡蛎ACE抑制肽的降血压机制。结果表明,牡蛎ACE抑制肽可能通过减少ANG II的生成,使得ALD含量减少,实现降血压效果;同时牡蛎ACE抑制肽不会对SHR造成伤害。(3)以ACE抑制率和游离氨基酸减少量为指标,选用中性蛋白酶对酶解产物进行Plastei n反应修饰。根据单因素试验结果,确定Plastein反应最适酶解工艺为:底物质量分数为45%,加酶量3%,酶解温度60℃,酶解时间为2 h。Plastein反应前后游离氨基酸含量对比结果表明:Plastein反应可以将疏水性氨基酸整合到牡蛎肽中,从而提高ACE抑制率。(4)对小试的制备工艺进行了中试放大试验。通过改进中试工艺,采用超滤-纳滤联用工艺制备出高活性的牡蛎ACE抑制肽。结果表明:中试生产制备的牡蛎ACE抑制肽活性和纯度与小试样品基本一致,说明该工艺可以用于牡蛎ACE抑制肽的产业化生产。
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