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猫免疫缺陷病毒(feline immunodeficiency virus,FIV)是逆转录病毒科慢病毒属成员,该病毒主要破坏猫科动物的免疫系统,导致TCD4+淋巴细胞的衰竭,造成免疫抑制,引起由继发感染和机会感染,主要临床症状表现为口炎、中枢神经疾病、皮肤病、腹泻、肺炎等,严重地导致死亡。FIV感染呈全球性分布,主要经血液、唾液和尿液传播。FIV除了感染流浪猫外,近年来,国外野生动物园不断有狮、虎、豹等野生猫科动物感染FIV的报道,而我国目前关于流浪猫和其它野生猫科动物FIV的感染情况几乎处于空白状态。因此,建立该病的快速诊断方法,开展流行病学调查,采取相应的预防措施和管理办法,对降低FIV对流浪猫、大型猫科动物的危害以及野生猫科动物的管理均具有重要意义。 本实验收集哈尔滨市和上海市流浪猫全血样本274份,通过ELISA检测得到17只FIV阳性,2只猫白血病(feline leukemia virus,FeLV)阳性,巢式PCR检测FIV11只为阳性,PCR检测FeLV均为阴性。FIV阳性检出率为4%(11/274),其中上海5只,哈尔滨6只;雄猫8只,雌猫3只。通过巢式PCR扩增gag基因CA片段检测FIV病毒,对FIV env V3-V5进行系统发育分析,确定11个阳性样品均为A亚型。克隆得到一株完整的FIV基因组DNA序列,确定其主要开放阅读框:gag,pol,env,vif对应的大小分别为1350bp,3096bp,2565bp,756bp;对应编码氨基酸个数分别为449aa,1031aa,854aa,251aa;GenBank登录号为MF352016。与PPR(M36968)和Petaluma(NC001482)进行同源性分析,gag为96.64%,95.55%;env为87.70%和93.70%;pol为83.76%和95.59%;vif为91.0%和93.43%。完整核苷酸序列与亚型A的FIVCG(M25381)和Petaluma(NC001482)同源性分别为93.11%和93.16%,亚型C的BM3070(AF474246)为81.22%。与非洲狮分离株1027(EU117992)同源性52.01%。 综上,本实验共检出11只阳性猫FIV,总检出率4%,构建进化树确定其为A亚型。FIV主要ORF遗传进化分析显示,长期的遗传变异过程中gag和pol基因相对保守,env则显出了巨大的多样性。