BoneCeramic与Bio-Oss骨粉对促进SD大鼠PAOO术后成骨效果的比较研究

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目的在SD大鼠上建立牙周加速成骨正畸(Periodontally accelerated osteogenic orthodontics,PAOO)动物模型,在术中分别植入Bone Ceramic骨粉颗粒和Bio-Oss骨粉颗粒,比较术后牙槽骨成骨效果。体外实验比较两种骨粉颗粒对SD大鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)在生长、黏附及成骨分化的影响。本研究探讨Bone Ceramic作为纯合成骨移植材料是否能够增加PAOO术后牙槽骨骨量及其及相关机制,为未来临床实践提供了一定的理论依据。方法72只8周龄雄性SD大鼠(250-300g),随机分成3组分别为:单纯牙槽骨骨皮质切开术组(CO组);牙槽骨骨皮质切开术+Bio-Oss骨粉植入组(BO组);牙槽骨骨皮质切开术+Bone Ceramic骨粉植入组(BC组)。手术均在大鼠右上颌第一磨牙腭侧进行,所有大鼠在手术后即刻使用标准的正畸闭合定力弹簧(力量50g)牵引大鼠右上第一磨牙近中移动。在正畸激活后的第7、14、28、60天分别从各组中随机抽取6只安乐死,解剖大鼠的右侧上颌骨骨骼标本进行Micro-CT检查,对60天骨骼标本进行组织学检查。在体外培养SD大鼠BMSCs,CCK-8试剂盒检测Bone Ceramic骨粉材料和Bio-Oss骨粉材料对BMSCs生长的影响,用扫描电子显微镜(Scanning electron microscope,SEM)观察BMSCs在两种骨粉材料表面的黏附情况,碱性磷酸酶试剂盒检测BMSCs的ALP活性,荧光定量PCR(qPCR)检测成骨相关基因RUNX-2、OPN和OCN的表达程度。结果实验动物模型在建立后SD大鼠健康状况良好,在实验全过程中均无进食困难,所有大鼠能耐受实验。Micro-CT测量分析显示在7、14、28、60天四个时间节点时三组大鼠右上第一磨牙牙齿移动距离均无统计学差异(P>0.05);在0-7、7-14、14-28、28-60四个时间段内三组大鼠右上第一磨牙牙齿移动速率均没有差别(P>0.05)。三组大鼠在第7、14天时,牙槽骨高度丧失(Alveolar bone height loss,ABHL)、牙槽骨宽度(Alveolar bone width,ABW)和相关区域骨体积分数(Bone volume fraction,BVF)均没有统计学差异(P>0.05),在28、60天时CO组ABHL值均大于BO、BC组(P<0.05),ABW和BVF均低于BO、BC组(P<0.05),同时在60天时BO组ABHL值高于BC组(P<0.05),ABW值和BVF值低于BC组(P<0.05)。60天组织学评估显示,与CO组相比,两骨粉植入组都有新生骨组织形成,并且BC组相比于BO组新生骨组织更多,残留骨粉颗粒更少。CCK-8检测结果显示两种骨粉材料浸提液对BMSCs生长具有生物相容性,没有抑制作用;SEM检测结果显示BMSCs在Bone Ceramic材料表面黏附更多并且更紧密;ALP活性检测显示BMSCs在Bone Caremic材料表面的ALP活性更高,并且成骨相关基因RUNX-2、OPN和OCN表达更高。结论Bone Ceramic与Bio-Oss均能够促进SD大鼠PAOO术后牙槽骨成骨,并且相比于Bio-Oss,Bone Ceramic术后成骨效果更佳。
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