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本文对蜂王浆蛋白酶解工艺进行了比较深入的研究,采用蛋白提取、酶解、抗氧化试验、凝胶色谱(GC)、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、反相高效液相色谱(RP-HPLC)等方法,系统研究了王浆蛋白的提取方法、酶种的筛选、酶解工艺的各主要参数、酶解物体内外抗氧化活性、抗氧化肽的分离纯化,为开发王浆抗氧化肽功能性产品提供理论基础。主要研究结果如下：1.比较了蜂王浆中蛋白质的4种提取方法,其中以透析方法提取的蜂王浆蛋白总氮和可溶性蛋白含量最高。然后分别用胃蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶5种蛋白酶对王浆蛋白进行酶解,以水解度和DPPH自由基清除率为检测指标,得出胃蛋白酶酶解透析得到的王浆蛋白的DPPH自由基清除率最高,为38.65%。采用响应面设计进行试验优化,得到最优酶解条件为[E]/[S]2.24%、底物浓度1.61%、酶解时间3.7h,在该条件下制备的透析王浆蛋白酶解物的DPPH自由基清除率为47.84%。2.通过DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力、还原力和抗脂质过氧化能力的测定,得出在水解度为4.18%时,DPPH自由基清除能力最高52.43%；在水解度为4.50%时,羟自由基清除能力最高39.19%；在水解度为4.18%时,还原力最高0.263；在水解度为4.50%时,抗脂质过氧化能力最高13.19%。3.对王浆蛋白酶解物进行体内抗氧化活性测定,结果表明王浆蛋白酶解物在某些剂量下比王浆蛋白和维生素C更能显著提高D-半乳糖衰老模型小鼠血清和肝脏组织中SOD和GSH-Px的活性,并且显著降低其体内MDA的含量,说明王浆蛋白酶解物对小鼠具有良好的体内抗氧化防衰老作用,其作用机理还需要进一步探讨。4.利用Sephadex G-25凝胶色谱将蜂王浆蛋白酶解物洗脱分离出2个组分F1和F2。并发现组分F2的DPPH自由基清除能力强于F1。通过对蜂王浆蛋白及其相关组分的SDS-PAGE检测发现,随着水解度的升高,王浆蛋白中大分子量的蛋白会逐渐降解为小肽,组分F1和F2的分子量都小于14.4kDa,还进一步证实了蜂王浆的主要蛋白为MRJP1。RP-HPLC分析发现F1组分由7种组分构成,F2组分由3种组分构成。氨基酸成分分析发现天冬氨酸、谷氨酸含量较高,这可能与蜂王浆呈现出酸性有关。