目的:研究雌、孕激素对人子宫内膜样癌（endometrioid carcinoma,EC）JEC细胞中雌激素受体（estrogen receptor,ER）亚型ERα、ERβ,孕激素受体（progesterone receptor,PR）亚型PR-A、PR-B,及p57^kip2蛋白表达的影响,以探讨女性激素调控、细胞周期调控与EC发生发展之间的关系。方法:实验组:分别用三种不同浓度的雌二醇（β-estradiol,E₂）（10-6 mol/L、10-8 mol/L、10-10 mol/L）、孕酮（Progesterone,P）（10-4 mol/L、10-6 mol/L、10-8 mol/L）干扰体外培养的JEC细胞（中分化EC细胞）;对照组:用不含药物的等量培养基培养JEC细胞。分别培养24、48、72、96h后,用MTT法观察JEC细胞的生长情况;培养24、48、72h后,在光镜、电镜下观察JEC细胞的生长情况及超微结构变化,用免疫蛋白印迹（Western Blot,WB）法检测JEC细胞中ERα、ERβ、PR-A、PR-B、p57^kip2蛋白的表达情况。结果:1.MTT法观察JEC细胞的生长情况:随着E₂、P干扰时间的延长,对照组与实验各组JEC细胞均逐渐增长（P<0.05）。E₂三种浓度均可促进JEC细胞的生长,且随药物浓度的增高促进作用更明显（P<0.05）;P低、中浓度组可促进JEC细胞的生长,高浓度组则抑制JEC细胞的生长（P<0.05）。2.倒置显微镜观察JEC细胞的生长情况:培养72h后,对照组JEC细胞呈多边形、长梭形、不规则形,可见腺腔样结构,伴少量细胞凋亡。与对照组比较,E₂各浓度组细胞密度均明显增加,以高浓度组最甚;P低、中浓度组细胞密度明显增加,高浓度组则减小。各组细胞形态变化不明显。3.透射电镜观察JEC细胞的超微结构变化:培养72h后,对照组JEC细胞呈圆形或椭圆形,表面有微绒毛,胞质中可见分泌泡、线粒体、内质网、高尔基复合体等细胞器,还可见次级溶酶体,核呈不规则形,核仁明显。与对照组比较,E₂各浓度组部分细胞分泌泡不明显、内质网肿胀,可见自噬现象,中、高浓度组细胞表面微绒毛肿胀,尤以高浓度组最明显;P各浓度组胞质内均可见自噬现象,高浓度组细胞表面微绒毛及胞质内分泌泡均增多。4.WB检测JEC细胞中ERα、ERβ、PR-A、PR-B、p57^kip2蛋白的表达情况:三种不同浓度E₂、P干扰后,对照组及实验各组JEC细胞均无ERα、PR-A、PR-B蛋白的表达,ERβ与p57^kip2蛋白有不同程度表达。（1）E₂干扰后ERβ、p57^kip2蛋白的表达情况:随着E₂干扰时间的延长、作用浓度的增加,ERβ蛋白表达增加,p57^kip2蛋白表达降低（P<0.05）。ERβ蛋白、p57^kip2蛋白表达之间具有负线性相关关系。（2）P干扰后ERβ、p57^kip2蛋白的表达情况:（1）相同作用时间比较:随着药物作用浓度的增高,ERβ蛋白在24、72h表达逐渐增加,在48h高浓度组表达最高,中浓度组表达最低（P<0.05）;p57^kip2蛋白随着药物作用浓度的增高表达增高（P<0.05）。（2）相同作用浓度比较:随着P干扰时间延长,高浓度组ERβ蛋白表达逐渐增高,低、中浓度组在72h表达最高,在48h表达最低（P<0.05）;p57^kip2蛋白随P干扰时间的延长表达增高（P<0.05）。ERβ蛋白、p57^kip2蛋白表达之间无相关关系。结论:EC的生长、分化均可能受到女性激素及细胞周期的调控。E₂可能通过上调JEC细胞中ERβ蛋白的表达、抑制p57^kip2蛋白的表达,以解除p57^kip2负向调控细胞周期进程的作用,明显促进JEC细胞的生长,并使其向更差的分化方向发展;P可上调JEC细胞中ERβ、p57^kip2蛋白的表达,浓度较低时以ERβ蛋白促细胞生长的作用为主,浓度较高时则以p57^kip2蛋白阻滞细胞周期进程的作用为主导,使肿瘤细胞向较好的分化方向发展;JEC细胞均不表达ERα、PR-A、PR-B蛋白,且E₂、P均无法诱导其表达。联合检测ERα、ERβ、PR-A、PR-B、p57^kip2蛋白在EC中的表达情况,可能更有利于评估EC的发生发展。目的:研究雌激素受体拮抗剂对人子宫内膜样癌（endometrioid carcinoma,EC）JEC细胞中雌激素受体（estrogen receptor,ER）亚型ERα、ERβ,孕激素受体（progesterone receptor,PR）亚型PR-A、PR-B,以及p57^kip2蛋白表达的影响,以进一步探讨雌激素调控、细胞周期调控与EC发生发展之间的关系。方法:实验组:分别用两种ER拮抗剂【他莫昔芬（Tamoxifen,TAM）（10-6mol/L）,氟维司群（Fulvestrant,ICI182780）（10-6mol/L）】及雌二醇（β-Estradiol,E₂）（10-6mol/L）干扰体外培养的JEC细胞（中分化EC细胞）;对照组:用不含药物的等量培养基培养JEC细胞。分别培养24、48、72、96h后,用MTT法观察JEC细胞的生长情况;培养24、48、72h后,在光镜、电镜下观察JEC细胞的生长情况与超微结构变化,用免疫蛋白印迹（Western Blot,WB）法检测JEC细胞中ERα、ERβ、PR-A、PR-B、p57^kip2蛋白的表达情况。结果:1.MTT法观察JEC细胞的生长情况:随着药物干扰时间的延长,对照组与实验各组JEC细胞均逐渐增长（P<0.05）。与对照组比较,E₂组细胞增殖能力增强（P<0.05）,ICI182780组细胞增殖能力降低（P<0.05）,TAM组细胞增殖能力增强（P>0.05）;与E₂组比较,E₂+ICI182780组细胞增殖能力降低（P<0.05）,E₂+TAM组细胞增殖能力降低（P>0.05）。2.倒置显微镜观察JEC细胞的生长情况:培养72h后,对照组JEC细胞呈多边形、长梭形、不规则形,可见腺腔样结构,伴少量细胞凋亡。与对照组比较,E₂组细胞密度增大,ICI182780组细胞密度减小,其他各组细胞密度变化不明显;与E₂组比较,E₂+TAM组与E₂+ICI182780组细胞密度均减小;各组细胞形态变化不明显。3.透射电镜观察JEC细胞的超微结构变化:培养72h后,对照组JEC细胞呈圆形或椭圆形,表面有微绒毛,胞质中可见线粒体、内质网、高尔基复合体等细胞器,还可见次级溶酶体,分泌泡不明显,偶见脂滴;核呈不规则形,核仁明显。与对照组比较,E₂组细胞病理性核分裂象易见;ICI182780组部分细胞胞质中自噬现象增多。与E₂组比较,E₂+TAM组与E₂+ICI182780组细胞病理性核分裂象少见。4.WB检测JEC细胞中ERα、ERβ、PR-A、PR-B、p57^kip2蛋白的表达情况:对照组及实验各组JEC细胞均无ERα、PR-A、PR-B蛋白的表达,ERβ与p57^kip2蛋白有不同程度的表达。（1）ER拮抗剂干扰后ERβ蛋白的表达情况:（1）相同作用时间比较:与对照组比较,ERβ蛋白在E 2组表达增加,在TAM组与ICI182780组表达均减少,且ICI182780组减少更明显（P<0.05）。与E₂组比较,ERβ蛋白在E₂+TAM组与E₂+ICI182780组表达均减少,且E₂+ICI182780组减少更明显（P<0.05）。（2）相同药物分组比较:随着药物作用时间的延长,ERβ蛋白在E₂组表达增加,在TAM组与ICI182780组表达减少（P<0.05）。（2）ER拮抗剂干扰后p57^kip2蛋白的表达情况:（1）相同作用时间比较:与对照组比较,p57^kip2蛋白在E₂组表达减少,在TAM组与ICI182780组表达增加,且ICI182780组增加更明显（P<0.05）。与E₂组比较,p57^kip2蛋白在E₂+TAM组与E₂+ICI182780组表达均增加,且E₂+ICI182780组增加更明显（P<0.05）。（2）相同药物分组比较:随着药物作用时间的延长,p57^kip2蛋白在E₂组表达减少,在TAM组与ICI182780组表达增加（P<0.05）。TAM与ICI182780干扰后,ERβ蛋白、p57^kip2蛋白表达之间均具有负线性相关关系。结论:ICI182780有较强的拮抗雌激素的作用,可能通过下调JEC细胞中ERβ蛋白的表达,诱导p57^kip2蛋白的表达增加,发挥其阻滞细胞周期进程的作用,抑制肿瘤细胞的生长;TAM有较弱的拮抗雌激素的作用,对JEC细胞的生长有较弱的促进作用,可能TAM在JEC细胞中发挥ER拮抗剂作用的同时,也发挥较弱的雌激素样作用。JEC细胞均不表达ERα、PR-A、PR-B蛋白,且TAM、ICI182780均无法诱导其表达。在JEC细胞中,ICI182780比TAM拮抗雌激素的作用更强,可能更适合用于EC患者的内分泌治疗。这对EC患者内分泌治疗药物的选择有重要参考价值。