胶原-磁性微球固定化脂肪酶的制备及其催化煎炸废油制备生物柴油的研究

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餐饮废油是一类同时具有资源性和污染性的物质,其产生量随着经济和餐饮行业的飞速发展日益增多,若处理不当不仅造成资源的浪费还会污染环境。煎炸废油作为餐饮废油的一种,将其用于生物柴油的制备是其绿色环保的高值利用途径之一,而固定化酶催化酯交换反应制备生物柴油是目前国内外研究最多的方法,其中磁性纳米材料因为有着大比表面积和易于修饰等优点被广泛用作固定化酶的载体。胶原蛋白作为一种可再生天然高分子物质,有着良好的生物相容性和环境友好性,将其作为磁性载体固定化酶过程中的稳定剂和载体,对磁性纳米材料有较好的分散作用及对固定化酶活性有较好的保护作用。本研究采用共沉淀法制备了胶原-磁性微球(CM)作为固定化脂肪酶的载体,以戊二醛为交联剂固定化脂肪酶制备得到胶原-磁性微球固定化脂肪酶(CML)。将CML用于催化煎炸废油制备生物柴油,并对催化条件进行优化,考察了CML的重复催化性能,并对催化产物生物柴油的脂肪酸甲酯组成进行了分析。主要研究内容及结果如下:1)CML的制备及表征:考察了固定化条件对CML活性及固定化效率的影响,结果表明最佳固定化条件为:脂肪酶浓度3.0 mg/m L,胶原蛋白浓度2.5%,PBS溶液p H值7.0,固定化时间3 h,温度35°C,戊二醛浓度2.5%。采用TEM、XRD、VSM和FT-IR等手段对CML进行表征,结果表明脂肪酶被成功地固定在CM的表面,并且CML还具有超顺磁性,利于产物与酶的有效分离和CML的重复利用。2)CML的性质进研究:CML的温度和p H耐受性都强于游离酶,操作稳定性好和储存稳定性都较好。CML在-20°C、4°C和25°C的环境下储存38 d后,仍能分别保持50%、40%和20%左右的活性,而游离酶在28 d时几乎全部失活。3)考察了CML催化煎炸废油制备生物柴油的条件对生物柴油酯化率的影响。结果表明最佳合成条件为:溶剂为正己烷且其添加量为0.5 m L/g,CML添加量15%,醇油摩尔比4:1,含水量0.4%,反应时间24 h,此时生物柴油的酯化率为83%。4)CML具有良好的重复催化性能,经过5次循环后仍能保持60%左右的生物柴油酯化率。该生物柴油制品的脂肪酸甲酯组成有6种,分别是棕榈酸甲酯、亚油酸甲酯、油酸甲酯、硬脂酸甲酯、顺-11-二十碳烯酸甲酯和芥酸甲酯。
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