论文部分内容阅读
目的探讨miR-196a及其靶基因HoxB8 mRNA在不同宫颈癌细胞株中的表达情况,HoxB8基因对宫颈癌细胞凋亡的影响;探讨HoxB8蛋白在宫颈鳞癌组织中的表达及临床意义。方法1.通过实时荧光定量PCR检测宫颈癌Caski、SiHa、C33-A和HeLa细胞系中miR-196a和HoxB8 mRNA的表达情况;通过q RT-PCR检测miR-196a模拟物转染宫颈癌SiHa细胞后对HoxB8表达的影响;通过HoxB8 siRNA瞬时转染宫颈癌SiHa细胞后检测Caspase3/7的活性;2.收集整理广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科2011年2月至2012年12月行宫颈活检术67例HPV16(+)IIb-IIIb期宫颈鳞癌放化疗或放疗病例的临床病理资料,并在病理科标本库找出其石蜡标本。通过免疫组化染色的方法研究HoxB8的表达情况,并进一步分析其与各临床病理因素及预后的关系。用卡方检验或Fisher精确检验进行与临床病理因素间相关性比较,Kaplan-Meier法计算生存率,Log-rank法进行生存曲线比较,Cox回归模型进行多因素分析。结果1.实时荧光定量PCR结果显示,miR-196a在HPV16阳性的Caski和SiHa细胞系中的表达明显低于HPV16阴性的C33-A和HeLa,差异具有统计学意义(P<0.001);与之相对应的,HoxB8在HPV16阳性的Caski和SiHa细胞系中的表达则明显高于HPV16阴性的C33-A和HeLa,差异具有统计学意义(P<0.001);miR-196a可下调HoxB8的表达;Capase3/7活力检测结果显示,Capase3/7活力在SiHa细胞HoxB8 si RNA转染组明显高于阴性对照组和正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。2.HoxB8阴性10例,阳性57例(85%)。染色结果与各临床病理因素相关性分析显示HoxB8与年龄、肿瘤最大径、治疗前SCC、分化程度、FIGO分期均无统计学意义。67例患者失访率19.4%,中位总生存时间为48个月,1年、3年、5年总生存率分别为91%、66%和54%。单因素及多因素生存分析显示,肿瘤最大径>4cm、单纯放疗是IIb-IIIb宫颈鳞癌患者预后不良的独立危险因素,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论miR-196a可能通过下游靶基因HoxB8影响宫颈癌细胞凋亡;HoxB8与HPV16(+)IIb-IIIb期宫颈鳞癌患者年龄、肿瘤最大径、治疗前SCC、分化程度、FIGO分期无明显相关性;肿瘤最大径>4cm、单纯放疗HPV16(+)IIb-IIIb宫颈鳞癌患者总生存时间缩短,肿瘤最大径、治疗方式是影响OS的独立危险因素;HoxB8与HPV16(+)IIb-IIIb期宫颈鳞癌患者预后无明显相关性。