目的:膀胱癌是全球十大恶性肿瘤之一,是我国发病率最高的泌尿生殖系肿瘤,在男性中排名第四位。膀胱癌的治疗通常涉及膀胱切除或化学放疗,但很多患者不适合手术治疗。临床常使用含铂类药物治疗,毒副作用大且易耐药。患者为PDL1阳性才能接受5种程序性死亡受体配体进行免疫治疗。I型铁死亡激动剂Erastin通过靶向抑制SLC7A11诱导多种肿瘤细胞发生铁死亡,但其在膀胱癌中的作用却并不清楚。紫草素可以抑制多种肿瘤细胞的增殖,且被反复报道为程序性坏死的诱导剂,但其强烈的非选择性细胞毒性会限制其临床应用。同时,程序性坏死与铁死亡之间的联系尚不清楚。本课题中,我们探讨了使用低浓度的Erastin和紫草素通过靶向SLC7A11/RIP3/Nrf2诱导膀胱癌细胞死亡的分子机制和抗肿瘤转移作用。方法和结果:（1）MTT法检测了I型铁死亡激动剂Erastin对不同膀胱癌细胞株（EJ、T24、BIU、J82）细胞活力的影响。MTT结果显示:Erastin对膀胱癌细胞增殖无明显抑制,膀胱癌细胞对Erastin不敏感;（2）为了研究靶向SLC7A11能否促进低浓度的紫草素对膀胱癌细胞的增殖产生影响,将Erastin与紫草素以浓度依赖和时间依赖的方式处理4种膀胱癌细胞。MTT检测发现,靶向SLC7A11促进低浓度紫草素以浓度依赖和时间依赖的方式降低细胞存活率,且膀胱癌细胞EJ和T24较敏感;（3）为了研究靶向SLC7A11促进低浓度紫草素诱导的膀胱癌细胞死亡是否是程序性坏死,通过Western blotting检测了程序性坏死相关蛋白表达量的变化。结果显示,RIP1、RIP3、p-MLKL蛋白表达增加,靶向SLC7A11促进了低浓度紫草素诱导的膀胱癌细胞程序性坏死;RIP1特异性抑制剂Nec-1能通过降低坏死关键蛋白的表达逆转靶向SLC7A11低浓度紫草素诱导的细胞死亡;（4）为了研究靶向SLC7A11促进低浓度紫草素诱导的程序性坏死与ROS之间的关系,流式细胞仪检测了靶向SLC7A11低浓度紫草素诱导EJ和T24细胞的ROS产量。结果显示Erastin促进了紫草素诱导膀胱癌细胞产生过量的ROS,同时降低线粒体膜电位。ROS抑制剂NAC几乎完全逆转了细胞死亡,坏死相关蛋白表达量降低。说明靶向SLC7A11促进低浓度的紫草素诱导膀胱癌细胞产生过量ROS诱导程序性坏死的发生;（5）上述实验中发现靶向SLC7A11促进低浓度的紫草素诱导膀胱癌细胞产生过量的ROS,造成了氧化损伤。Western blotting检测其对Nrf2信号通路的影响,结果发现,p-Nrf2的蛋白表达量在靶向SLC7A11的紫草素作用的前12 h以时间依赖的方式增加,12 h-24 h时,其表达量逐渐下降。下游的NQO1、HO-1蛋白表达变化与p-Nrf2保持一致。免疫荧光检测发现Nrf2的蛋白表达量下降,且从细胞核转移到细胞质中。与Nrf2抑制剂联用进一步促进了细胞死亡,以上结果说明靶向SLC7A11促进低浓度的紫草素先激活后抑制Nrf2信号通路;（6）在研究靶向SLC7A11促进紫草素对Nrf2通路的抑制中发现,P62蛋白发生了降解。为了查明靶向SLC7A11的紫草素是否诱导了自噬,免疫荧光检测到LC3荧光斑点增多,荧光强度增加。Western blotting检测到p-P70S6K表达降低,m TOR被抑制,P62降解,Beclin1表达增加,LC3累积,细胞发生自噬。自噬抑制剂LY294002通过抑制自噬进一步促进细胞死亡;（7）进一步研究了靶向SLC7A11促进紫草素诱导的细胞死亡与铁死亡之间的联系。Western blotting检测发现其降低了铁死亡蛋白SLC7A11和GPX4的表达,但铁死亡抑制剂Fer-1反而促进了细胞死亡。Western blotting结果显示Fer-1通过抑制自噬和进一步抑制Nrf2信号通路来促进膀胱癌细胞死亡;（8）为了研究靶向SLC7A11低浓度紫草素对于膀胱癌细胞侵袭转移能力的影响。Transwell结果显示靶向给药明显抑制了膀胱癌细胞的侵袭能力。Western blotting结果显示靶向SLC7A11低浓度紫草素增加了E-Cadherin蛋白的表达,降低了Vimentin蛋白表达量,抑制了膀胱癌的侵袭转移能力。结论:靶向SLC7A11促进低浓度的紫草素通过产生过量的ROS诱导膀胱癌细胞发生程序性坏死。Nrf2信号通路被激活后抑制,Nrf2抑制剂进一步促进了细胞的死亡。靶向SLC7A11促进膀胱癌细胞发生自噬,铁死亡蛋白SLC7A11和GPX4表达降低,铁死亡抑制剂Fer-1通过抑制自噬和进一步抑制Nrf2促进细胞死亡。同时,靶向SLC7A11促进低浓度紫草素抑制膀胱癌细胞的侵袭和转移。