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目的:(1)首先分离并鉴定金黄色葡萄球菌,培养金黄色葡萄球菌生物膜; (2)应用电镜观察金黄色葡萄球菌及其生物膜的形成过程; (3)分析红霉素破坏金黄色葡萄球菌与Ⅰ类整合子基本联系。 方法:(1)整理医院2016年8月-2017年03月进行检查操作的微生物样本,分离其中相关的金黄色葡萄球菌,选择以及鉴定其中的Ⅰ类整合子阳性菌。采取相关的银染法可以迅速的识别其基本的生物膜,存留相关的金黄色葡萄球菌成膜菌株同时着手构建相关的体外模型,在24h、48h、72h、5d的时间段中扫描电镜识别的生物膜信息。 (2)在分析中我们再次选择Ⅰ类整合子阳性菌株,将其划分成A、B、C三个组别:生物膜菌株可以制作为对应的A组,不成膜菌株则制作成为相关的B组,在液相环境之中的菌株则可以制作为C组。各个组别又划分为使用红霉素的实验组1以及不使用红霉素的对照组2。依次在24h、48h、72h、5d的时间中识别Ⅰ类整合酶基因的具体表达信息。 结果:(1)在实验中选择60例金黄色葡萄球菌,实际识别得出存在42例Ⅰ类整合子阳性菌;通过相关的药敏测试得出Ⅰ类阳性菌株的耐药性优于相关的阴性菌株,在某些方面代表着Ⅰ类整合子对于基本的耐药效应发挥显著的影响;采用银染法来进行观察,发现阳性菌在整体的成膜菌内占比为79.2%;采用扫描电镜进行观察:72h的时候能够发现成熟的生物膜,同时Ⅰ类阳性菌株的分布较为紧密,有着显著的成膜变化。 (2)实验中PCR检测发现金黄色葡萄球菌在相关的液相和生物膜形态之中,都有着Ⅰ类整合子mRNA的对应表达;使用相关的荧光定量PCR针对葡萄球菌在特定的分组环境之中,判断Ⅰ类mRNA的实际转录状况并开展定量研究,得出A2组的表达参数显著(p≤0.01)大于B2组,同时也显著(p<0.05)大于C2组,而且其中的差值会伴随培养时间的增加,对应的差异也会不断的增加。1d以及5d之后依次属于B2组的2.36、14.86倍。而针对实验组以及对照组增添对应的红霉素,在1d之后能够发现intI1表达存在显著的降低,3d之后mRNA表达能够发现显著的降低,而5d之后的差异性达到最为显著的状态(P≤0.01),A2、B2、C2依次属于A1、B1、C1的40.02、35.82、30.46倍。而A1相对于A2组、B1相对于B2组、C1相对于C2组的实验环节存在对应的显著性(p<0.05)下调,代表着相关的红霉素能够破坏对应的Ⅰ类整合子。基本的实验操作得出Sa生物膜的演变可有益于整合子在相关细菌之中的传播变化,而对于破坏SaⅠ类整合子而言红霉素能够发挥较强的影响力。 结论:(1)SaⅠ类阳性菌相对于阴性菌而言,有更高的几率发展形成相关的生物膜。 (2)Sa在生物膜环境之中的Ⅰ类整合酶mRNA的表达相对更高。 (3)依靠有关的实验程序能够论证红霉素可依靠破坏Ⅰ类整合子的方式,继而实现对于生物膜的破坏效应。