【摘 要】
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目的:利用RAPD技术对河北和黑龙江地区的板蓝根和大青叶进行分子水平上的鉴定和药材道地性的分析,突破了传统的性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别等方法,在DNA水平上为异地板蓝根
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目的:利用RAPD技术对河北和黑龙江地区的板蓝根和大青叶进行分子水平上的鉴定和药材道地性的分析,突破了传统的性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别等方法,在DNA水平上为异地板蓝根和大青叶提供一种新的鉴定方法,为不同地区、不同栽培环境的药用植物的生药学研究奠定基础。方法:以板蓝根和大青叶为实验材料,分别采用CTAB法、改进的CTAB法和试剂盒法(硅胶膜技术)对其基因组DNA进行提取和纯化,然后对其提取产物做光密度、琼脂糖凝胶电泳检测。采用RAPD技术对基因组DNA板蓝根和大青叶的多态性进行分析;利用紫外凝胶成像系统通过对电泳图像分析建立板蓝根和大青叶基因组DNA指纹图谱;利用NTSYS软件进行品种品系间UPGMA聚类分析。结果:1、改良的CTAB法适合板蓝根和大青叶基因组DNA的提取。2、从94条随机引物中筛选出10条有效引物。3、选取10个多态性最好的引物进行指纹图谱的构建。4、黑龙江的大青叶和河北的大青叶的遗传相似系数为0.6891892,亲缘关系最近。结论:1、确定了适合板蓝根和大青叶的最佳PCR-RAPD反应体系:2、共获得10张DNA指纹图谱,99条DNA谱带,其中75条为多态带(75.8%):3、建立基于RAPD技术的板蓝根和大青叶亲缘关系树型图,树型图的聚类结果与用经典方法研究的结论一致;4、运用RAPD技术为从分子水平阐明药材道地性的生物学实质提供可能;5、提出了道地药材板蓝根和大青叶在基因水平上产生遗传变异的新观点;
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