针刺曲池穴、血海穴对荨麻疹大鼠肥大细胞及IL-33/ST2表达的作用研究

来源 :辽宁中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sun949423350
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目的:本实验通过观察针刺预处理曲池穴与血海穴对荨麻疹大鼠体内IL-33/ST2表达及肥大细胞脱颗粒情况的影响,探讨针刺预处理曲池穴与血海穴治疗荨麻疹大鼠的作用及机制。材料与方法:35只6周龄SPF级雄性SD大鼠,先采用完全随机法选出3只SD大鼠制备抗卵白蛋白血清,其于32只适应性喂养1周后随机分为空白对照组、模型对照组、针刺治疗组、阳性药物组,每组8只,给与不同干预措施。针刺组给予针刺干预,针刺大鼠双侧曲池穴与血海穴,20分钟/次,每次1天;阳性药物组给与氯雷他定5ml/kg(?)d-1灌胃;模型对照组大鼠给予同体积生理盐水灌胃,日干预一次,连续干预7天,并于第5天使用稀释后的抗卵白蛋白血清对模型对照组、针刺治疗组以及阳性药物组实验大鼠背部标记点进行注射进行背部至敏造模,第7天进行抗原攻击并取材。对致敏部位皮肤组织进行HE法染色,观察致敏部位皮肤组织形态学变化;运用甲苯胺蓝染色法观察皮下疏松结缔组织中肥大细胞脱颗粒情况;运用Elisa法检测各组大鼠血清Ig E以及组胺水平;运用免疫组化法检测大鼠致敏区域皮肤组织内IL-33与ST2的表达情况。结果:1.预处理期间空白组大鼠状态一直保持正常,精神良好,活动灵敏,饮食二便正常;针刺组给与干预后,大鼠偶见情绪躁动表现,次数较少,其他如常;阳性药物组给与药物灌胃干预后,偶见各别大鼠活动相对减少,偶见便溏,其他如常。整个过程中实验大鼠全部存活,无死亡。抗原攻击后的1小时内,空白对照组大鼠较为安静,偶见搔挠注射部分,次数与频率较少;模型对照组大鼠明显躁动,频繁搔挠及挤蹭背部,活动度明显增加;针刺组与阳性药物对照组大鼠相比于模型组大鼠明显可见搔挠等表现均有不同程度减轻。2.抗原攻击后,空白对照组大鼠背部并未出现明显蓝斑,模型组大鼠蓝斑明显,蓝斑直径与空白对照组有统计学意义(P<0.01);与模型对照组相比,针刺组与阳性药物对照组蓝斑直径明显变小(P<0.01);针刺组与阳性药物对照组组间差异无统计学意义(P>0.05)。3.伊文斯蓝染料渗出量结果提示:空白对照组渗出染料量相对较少,模型组明显增高(P<0.01);与模型对照组相比,针刺组与阳性药物组相对减少(P<0.01或P<0.05),而针刺组与阳性药物对照组组间差异无统计学意义(P>0.05)。4.HE染色结果提示:空白对照组大鼠皮肤表皮层细胞结构正常,真皮层内可见胶原纤维排列规律,未见明显水肿以及炎症浸润;模型对照组大鼠皮肤表皮层结构残缺,表皮细胞混乱,真皮层内纤维排列杂乱无章,有炎症细胞浸润以及水肿发生;针刺组与阳性药物组大鼠皮肤表皮层细胞较规律排列,偶见表皮结构不完整,真皮层内纤维排列呈网状排列,间隙较模型组明显变小,炎症细胞与水肿情况呈不同程度减轻。5.甲苯胺蓝染色结果提示:空白对照组大鼠皮下结缔组织肥大细胞较完整,呈稳定状态,脱颗粒率低;与空白对照组相比,模型组大鼠肥大细胞脱颗粒率明显升高(P<0.01);与模型对照组相比,针刺组与阳性药物组肥大细胞脱颗粒情况明显减轻。脱颗粒率明显降低(P<0.01)。6.ELISA结果提示:与空白对照组相比,模型组大鼠血清Ig E与组胺水平均显著升高(P<0.01);与模型对照组相比,针刺组与阳性药物组大鼠血清Ig E与组胺水平较模型组均降低(P<0.01或P<0.05);而针刺组与阳性药物对照组组间差异无统计学意义(P>0.05)。7.免疫组化法结果提示:与空白对照组相比,模型对照组IL-33、ST2表达显著升高(P<0.01或P<0.05));与模型对照组相比,针刺组与阳性药物组IL-33、ST2表达相对降低(P<0.01);针刺组与阳性药物组两组间差异并无统计学意义(P>0.05)。结论:针刺曲池穴、血海穴对荨麻疹大鼠的作用可以通过抑制IL-33/ST2的表达来降低血清总Ig E水平,减少其与大鼠体内肥大细胞接触所引起脱颗粒以及组胺的释放情况,从而有效改善荨麻疹大鼠致敏部位皮肤所出现的皮肤形态学变化以及躁动瘙痒等表现,以起到治疗的目的。
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