目的：建立非小细胞肺癌(NSCLC)患者组织/血清microRNA(miRNA)的实时荧光定量PCR和xMAP液态芯片的检测方法，用其对NSCLC患者组织和血清miRNA的表达变化进行检测并进行分析，探讨miRNA在NSCLC发生发展中的作用及其在NSCLC诊断、治疗、预后中的应用价值。　　 方法：第一部分建立基于实时荧光定量PCR检测NSCLC患者组织/血清miRNA的方法，用该法检测40例NSCLC患者癌组织与癌旁组织的miR-21、miR-20a、miR-31、miR-222、miR-223、miR-145、miR-126的表达变化；检测40例NSCLC患者血清和40例正常对照组血清miR-21、miR-20a和miR-222的表达变化；并对20例血清与组织配对标本的miR-21、miR-20a和miR-222表达水平作相关性分析。　　 第二部分建立基于xMAP液态芯片技术检测NSCLC患者组织miRNA的方法，用该法检测40例NSCLC患者癌组织与癌旁组miR-21、miR-20a、miR-31、miR-222、miR-223、miR-145、miR-126的表达变化；对实时荧光定量PCR和xMAP液态芯片技术检测miRNA的表达变化作比较分析和评价。　　 结果：第一部分基于实时荧光定量PCR技术检测miRNA的方法既能有效对NSCLC患者组织miRNA又能对其血清miRNA作定量分析；NSCLC患者癌组织miR-21、miR-20a、miR-31、miR-222较癌旁组织呈高表达(P<0.05)，其中miR-31、miR-20a呈显著高表达，增高倍数大于2(P<0.01)；而miR-223、miR-145、miR-126呈低表达(P<0.05)。miR-21表达随病情进展而逐渐升高；miR-222表达随分化程度的降低、肿块直径的增大而升高；miR-126表达随病情的进展和分化程度的降低而降低。NSCLC患者血清miR-21、miR-20a、miR-222呈高表达(P<0.05)，其中miR-222呈显著高表达，增高倍数大于2。miR-222表达随病情的发展、分化程度的降低、肿块直径的增大而升高。NSCLC患者癌组织miR-21、miR-20a、miR-222表达水平与其血清表达水平呈正相关，相关系数分别为0.898、0944、0.946。　　 第二部分基于xMAP液态芯片技术高通量检测NSCLC患者组织miRNA的方法初步建立成功，用该法检测NSCLC患者组织miRNA表达，结果发现NSCLC癌组织miR-21、miR-20a、miR-31、miR-222较癌旁组织呈高表达(P<0.05)，而miR-145、miR-126呈低表达(P<0.05)，miR-223无显著性差异(P>0.05)。实时荧光定量PCR和xMAP液态芯片技术检测miR-21、miR-20a、miR-31、miR-222、miR-145和miR-126相关性较好，相关系数分别为0.631、0.717、0.604、0.810、0.601、0.702。而miR-223相关系数仅为0.105，可能不具相关性。　　 结论：(1)基于实时荧光定量PCR和xMAP液态芯片技术检测NSCLC组织/血清miRNA的方法具有特异性高，灵敏度好的特点；xMAP液态芯片技术检测miRNA还具有所需的标本量少(仅需2μl)、不需要样本基因扩增、高通量、多指标灵活组合同时检测等优点。(2)miR-21、miR-20a、miR-31、miR-222、miR-145、miR-126这6种miRNA在NSCLC癌组织和癌旁组织中的表达有显著性差异，具有十分重要的诊断价值。(3)NSCLC血清和癌组织miR-21、miR-20a、miR-222表达水平均显著增高且具正相关性，miR-21、miR-20a、miR-222这3种miRNA有望成为诊断NSCLC的血清标志物。(4)miR-21、miR-20a、miR-31、miR-222可能以高表达形式，而miR-145、miR-126可能以低表达形式参与了NSCLC的发生发展。