论文部分内容阅读
背景和目的:神经内分泌肿瘤(neuroendocrine neoplasms,NENs)是一类相对罕见的肿瘤,因缺乏有效的诊断、治疗方法,目前对该类疾病的诊断和治疗比较困难。本研究旨在分析影响NENs患者预后的因素,寻找NENs新的治疗靶点。方法:回顾性分析205例NENs患者的资料并对其中157例进行随访,总结NENs患者的临床特征和预后因素进行生存分析。使用mi RNA Target-Scan,发现前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)是mi R-224的靶基因并利用荧光素酶报道基因进行确认。通过转染mi R-224激动剂(agomir)和PCSK小干扰RNA(si RNA)来上调或下调胰腺神经内分泌肿瘤(pancreatic neuroendocrine neoplasms,p-NENs)细胞株(BON-1)中PCSK9的表达;采用q RT-PCR、Western blot分析mi R-224对于PCSK9 RNA和蛋白质表达水平的影响;采用酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测糖皮质激素(glucocorticoid,GC)水平;利用原位末端转移酶标记技术(Td T-mediated d UTP nick end labeling,TUNEL)和Transwell迁移、侵袭试验分别检测mi R-224和PCSK9对BON-1细胞凋亡和迁移侵袭能力的影响。结果:我们发现自2012年至2015年,NENs的发病率逐年增加。女性病人的诊断时间往往比男性病人早(P<0.05)。肿瘤分级与肿瘤的原发部位有关,原发于食管和贲门的NENs分级均为G3(P<0.001)。年龄、肿瘤分级和低密度脂蛋白(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)水平是消化道NENs的独立危险因素。LDL-C水平与患者存活率和总生存期(overall survival,OS)显著相关(P<0.05)。Mi RNA-224 agomir和PCSK9 si RNA能促进BON-1细胞凋亡,抑制其增殖和侵袭(P<0.05),同时促进GC的分泌(P<0.05)。结论:年龄、肿瘤级别和LDL-C水平是NENs的独立危险因素。mi R-224/PCSK9/GC轴可能与p-NENs的发生和预后有关。