目的:利用不同的化学药物诱导斑马鱼心脏损伤模型并进行探讨,选取模型后,用升陷汤水提物进行干预,探索升陷汤对心脏损伤的保护作用,为升陷汤临床治疗心血管疾病提供一定的依据,并为其相关机制的研究提供可能的方向。方法:选用受精后发育正常的斑马鱼(cmlc2-GFP)胚胎,应用化学药物乌头碱、马兜铃酸、呋喃唑酮、氯化钡药浴制备心脏损伤模型,制备模型后,应用升陷汤水提物及其君药黄芪的药理活性成分黄芪甲苷进行药物干预,通过测量其心率、SV-BA间距以及心脏形态的变化,观察升陷汤对心脏损伤的保护作用,并通过RNA-seq检测与网络药理学分析方法,为相关机制的研究提供一定的方向。结果:1.乌头碱、马兜铃酸、呋喃唑酮、氯化钡均能诱导斑马鱼心脏损伤:(1)乌头碱15mg/L可导致斑马鱼心率加快、SV-BA间距延长、心包水肿以及血细胞堆积;(2)马兜铃酸5μmol可导致斑马鱼心率减慢、SV-BA间距延长、心脏搏动减弱等;(3)呋喃唑酮16、32μg/ml可导致斑马鱼心率减慢、SV-BA间距延长、血细胞堆积;(4)氯化钡0.05%、0.1%可导致斑马鱼心率减慢、SV-BA间距延长、心房心室呈狭长型。2.选取各组心脏损伤模型后,通过升陷汤水提物及黄芪甲苷药物筛选实验,发现:(1)升陷汤20μg/ml及黄芪甲苷40μg/ml能够在一定程度上拮抗低乌头碱诱导的心律失常;(2)对乌头碱组、空白组、乌头碱加升陷汤组以及乌头碱加黄芪甲苷等组进行RNA-seq检测,发现乌头碱导致SGK1、ATP2A1、NPY、CRHB、钾通道相关基因(KCNJ1A.3、KCNJ1A.5、KCNJ1A.6、KCNJ12B)表达上调,SLC8A4A、KCNB2下调;而升陷汤水提物能够下调NPY、CRHB、KCNA1A的表达,上调ATP1A1A.2的表达,并对谷氨酸能突触通路、GABA能突触通路有较大的影响;乌头碱加黄芪甲苷组可上调SLC8A4A、钾通道相关基因(KCNK5A、KCNA3A、KCNA4、KCNA6A)的表达;(3)对升陷汤治疗心律失常可能相关的因素进行网络药理学分析,推测升陷汤可能通过调控钠通道、钾通道基因,以及影响HIF-1通路中部分基因的表达而发挥治疗心律失常的作用,与斑马鱼RNA-seq检测的结果具有部分一致性。结论:1.乌头碱、马兜铃酸、呋喃唑酮、氯化钡均能诱导斑马鱼心脏损伤模型,其损伤的表现有一定的差异;2.乌头碱诱导斑马鱼心脏损伤的表现中包括心律失常,这与乌头碱导致钠通道、钙通道、钾通道失调以及交感神经兴奋有关;3.升陷汤可在一定程度上拮抗乌头碱诱导的心脏损伤,其主要表现在心律失常方面,这与升陷汤下调NPY、CRHB相关基因的表达,并协调GABA能突触、谷氨酸能突触的平衡从而抑制交感神经兴奋以及调节钠、钾通道有关;而黄芪甲苷可在一定程度上拮抗乌头碱诱导的心律失常,与调节钙通道、钾通道有关;4.网络药理学技术提示升陷汤治疗心律失常可能通过调节钠通道、钾通道基因的表达以及影响HIF-1通路而发挥作用。这为临床应用升陷汤治疗心律失常相关疾病以及相关机制的研究提供了一定的方向。