原位生成表面增强拉曼探针检测葡萄糖和糖蛋白

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表面增强拉曼散射(SERS)光谱是一种具有高灵敏度,高选择性,水干扰小和无损伤的检测技术,己经广泛应用与各种生物检测。由于血糖浓度增大而引起的糖尿病,已成为严重危害人类健康的慢性疾病。糖蛋白广泛存在于生物、植物、动植物中,扮演着至关重要的作用,例如,分子识别、免疫响应、细胞内的活化与信号表达等。蛋白的糖基化异常表达,会导致各种疾病的发生。许多糖蛋白成为疾病标志物和治疗靶标,用于疾病的诊断与评估。因此,高灵敏的检测葡萄糖和糖蛋白具有重要意义。银纳米粒子具有较好的SERS活性,Ag@Au核壳结构结合银纳米粒子和纳米金的优势,具有良好SERS活性和生物相容性。本文分别选用银纳米粒子和Ag@Au核壳纳米粒子作为SERS活性基底,利用SERS光谱技术,构建三明治夹层结构,结合原位生成拉曼探针实现葡萄糖和糖蛋白检测。主要研究进展:(1)在光滑的金基底表面自组装对巯基苯硼酸单层膜,通过苯硼酸与葡萄糖的一对顺式羟基结合形成硼酸酯,结合葡萄糖,再通过修饰对巯基苯硼酸的SERS标记物与葡萄糖的另一对顺式羟基形成硼酸酯,捕获SERS标记物,形成三明治夹心结构,实现葡萄糖检测。在拉曼光谱测试中,银纳米粒子表面的表观探针分子对氨基苯硫酚经过激光照射发生光催化偶联反应原位生成对巯基偶氮苯,作为真正的拉曼探针分子。对巯基偶氮苯具有很大的拉曼散射截面,产生很强的SERS散射峰,由此提高葡萄糖检测的灵敏性,形成的三明治夹层结构提高葡萄糖的检测选择性。(2)基于银纳米粒子具有较好的SERS活性,以及纳米金具有良好的生物相容性,由此制备Ag@Au核壳纳米粒子,将表观探针分子对氨基苯硫酚修饰于核壳结构之间,通过激光照射对氨基苯硫酚原位生成对巯基偶氮苯,作为真正的拉曼探针分子。相较于银纳米粒子能产生更强的SERS信号,提高糖蛋白的检测灵敏度。在光滑的金基底表面修饰对巯基苯硼酸自组装单层膜,结合糖蛋白,通过对巯基苯硼酸与糖蛋白的多糖基结合形成硼酸酯,捕获SERS标记物,形成三明治夹心结构,实现糖蛋白检测。
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