静电纺丝法制备组织工程皮肤支架及生物相容性的研究

来源 :福州大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:charles8025
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皮肤损伤尤其是大面积的皮肤创伤给患者带来巨大的痛苦,皮肤移植问题一直以来困扰着广大研究者。随着组织工程学的发展,利用组织工程学的方法构建皮肤支架,对解决皮肤创伤具有乐观的应用前景。静电纺丝法因其可制备具有类细胞外基质结构的纤维,这种结构的纤维利于细胞生长粘附,在组织工程领域被广泛应用。本论文通过静电纺丝法制备了两种组织工程皮肤支架,研究了这两种支架的微观结构等物理性质,并通过体外和体内实验,探究两种皮肤支架的生物相容性,得到下列结论:(1)通过静电纺丝法制备了明胶纳米纤维膜,并通过二氧化氯蒸汽处理得到皮肤支架材料。利用扫描电镜对所制得的明胶皮肤支架微观结构进行表征,结果表明成功制得直径约150nm的均一纳米纤维,且二氧化氯处理后纤维结构变得紧密。进一步水溶性试验和机械性能测试表明二氧化氯处理后的明胶纳米纤维膜符合皮肤支架的要求。研究了二氧化氯处理前后明胶纳米纤维体外降解率的不同,结果表明处理后的皮肤支架失重率显著降低。通过MTT法细胞毒性实验和细胞在支架材料的增殖实验表明所制得的皮肤支架细胞毒性低,细胞在支架材料上的生长情况良好。大鼠体内植入实验未发现不良反应,利用冰冻切片和H&E染色法发现植入支架材料的皮肤组织未见明显炎症,进一步验证了该皮肤支架具有优异的生物相容性。(2)首先用液相沉淀法成功制备出直径约20nm的类球状纳米氧化锌。进一步通过静电纺丝法制备几种不同量纳米氧化锌掺杂的壳聚糖-聚乳酸羟基乙酸复合纳米纤维皮肤支架材料,并研究了纳米氧化锌掺杂量对静电纺纤维的影响,发现在纳米ZnO掺杂量为7%时无法纺丝。并探讨了四种皮肤支架的力学性能和体外降解率。抑菌实验表明纳米氧化锌加入量与抗菌性能呈正相关性。MTT法结果表明纳米ZnO掺杂量在1%时,复合皮肤支架能促进细胞增殖是可选用的皮肤支架。进一步研究人皮肤成纤维细胞在该皮肤支架材料的生长情况,发现细胞能快速的增殖、粘附生长在支架外部并迁移到支架材料内部。同样在大鼠植入实验中无排斥反应发生,表明该支架材料的良好生物活性。本论文研究结果和结论,运用静电纺丝法制备的两种皮肤支架具有优异的生物相容性和生物安全性,为临床提供了两种皮肤移植的可行性支架材料。
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