病毒病是影响大白菜生产的三大病害之一。芜菁花叶病毒（Turnip mosaic virus,TuMV）属于马铃薯Y病毒科Y病毒属,是唯一侵染芸薹属作物的马铃薯Y病毒属病毒。目前芸薹属作物中已定位、克隆约20个抗TuMV基因,进一步揭示白菜抗TuMV的分子机制,有助于对白菜抗TuMV分子改良,同时对芸薹属蔬菜抗TuMV性状的遗传改良具有重要的指导意义和应用价值。白菜翻译起始因子是一类重要的隐性抗TuMV基因。本研究从8份白菜材料中克隆eIF4E/eIF（iso）4E基因拷贝,确定其与TuMV不同株系的互作关系,探究eIF（iso）4E与TuMV互作的关键氨基酸位点,并分析关键位点对蛋白空间结构的影响,构建互作模型,获得以下结果:1、在8份抗/感TuMV的白菜高代自交系材料中克隆eIF4E和eIF（iso）4E基因,获得eIF4E.a、eIF4E.c、eIF（iso）4E.a和eIF（iso）4E.c拷贝。对不同材料间eIF4E和eIF（iso）4E蛋白氨基酸序列进行比对,发现eIF4E蛋白氨基酸序列变异较大,而eIF（iso）4E蛋白氨基酸序列变异较小。2、通过酵母双杂交试验（Y2H）和双分子荧光互补试验（BiFC）分析,TuMV C4/CDN1/UK1/CHN2/CHN3株系与白菜eIF4E不互作,与eIF（iso）4E互作。TuMV C4/CHN2/CHN3株系与白菜eIF（iso）4E.a互作,与eIF（iso）4E.c不互作,而TuMV CDN1/UK1株系与白菜eIF（iso）4E.c互作,与eIF（iso）4E.a不互作。TuMV UK1株系属于第1致病型,TuMV C4/CHN2/CHN3株系属于第3致病型,TuMV CDN1株系属于第4致病型。TuMV C4/CHN2/CHN3株系与白菜eIF（iso）4E互作关系一致,推测同一致病型TuMV株系与白菜eIF（iso）4E的互作关系一致。3、通过SOE-PCR技术,定点突变TuMV C4/CDN1 VPg间5个差异氨基酸位点,TuMV UK1/CHN2 VPg间5个差异氨基酸位点,白菜BraA.eIF（iso）4E.c-1/2间4个差异氨基酸位点。通过酵母双杂交试验（Y2H）和双分子荧光互补试验（BiFC）分析,TuMV VPg蛋白的第I₅₂L和L₁₈₆F位氨基酸变异、白菜BraA.eIF（iso）4E.c蛋白的第L₃₆F位氨基酸变异,在TuMV与白菜eIF（iso）4E互作中起关键作用。4、利用Phyre2软件对白菜BraA.eIF（iso）4E.c-1蛋白空间结构进行同源模建,该蛋白包含8个β折叠,3个α螺旋和3个延伸环状结构。蛋白整体结构向内凹陷,形成一个“口袋”结构,“口袋”的核心区域是疏水中心。白菜BraA.eIF（iso）4E.c-1蛋白和BraA.eIF（iso）4E.c-2蛋白间差异四个氨基酸位点,分别为F₃₆L,A₅₂V,I₈₀T和P₁₅₀Q,第36位氨基酸正位于“口袋”疏水核心,且苯丙氨酸（F）和亮氨酸（L）的氨基酸性质差异较大,前者为芳香族氨基酸（包含苯环结构）,后者为脂肪族氨基酸。而第52、80和150位氨基酸变异对白菜eIF（iso）4E蛋白空间结构影响较小。5、根据TuMV与白菜eIF（iso）4E的互作关系,以及互作中关键氨基酸位点分析结果,构建二者的互作模型。白菜eIF（iso）4E与TuMV VPg互作,促进病毒在植株内繁殖、传播。当TuMV VPg蛋白氨基酸发生变异(例如I₅₂L),TuMV VPg蛋白空间结构发生变化,不能和白菜eIF（iso）4E蛋白相互作用;当白菜eIF（iso）4E蛋白氨基酸发生变异(L₃₆F),白菜eIF（iso）4E蛋白空间结构发生变化,不能和TuMV VPg蛋白相互作用,此时,TuMV遗传物质RNA不能在植物体内进行自身复制和传播,此时植株对TuMV产生抗性。