【摘 要】
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研究目的光动力疗法（Photodynamic therapy,PDT）因其微创性及良好的美容效果,被越来越广泛应用于皮肤鳞状细胞癌（Cutaneous squamous cell carcinoma,cSCC）的治疗。我们前期的研究发现以5-氨酮戊酸（5-Aminolevulinic acid,ALA）为光敏剂的PDT（ALA-PDT）能显著增加阿维A对cSCC细胞株SCL-1细胞的毒性作用,但阿
【基金项目】
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深圳市三名工程基金（编号:SZSM201812059）； 2016年深圳市科技创新委员会项目基金（编号:JCYJ20160428173958860）；
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研究目的光动力疗法（Photodynamic therapy,PDT）因其微创性及良好的美容效果,被越来越广泛应用于皮肤鳞状细胞癌（Cutaneous squamous cell carcinoma,cSCC）的治疗。我们前期的研究发现以5-氨酮戊酸（5-Aminolevulinic acid,ALA）为光敏剂的PDT（ALA-PDT）能显著增加阿维A对cSCC细胞株SCL-1细胞的毒性作用,但阿维A能否增强ALA-PDT对SCL-1细胞的作用目前尚不清楚。本课题拟研究阿维A预先处理后再进行ALA-PDT处理SCL-1细胞,从细胞形态、活性、凋亡等方面去研究阿维A预处理是否影响ALA-PDT对SCL-1细胞毒性的作用,并从SCL-1细胞活性氧（Reactive oxygen species,ROS）产生、细胞膜通透性方面初步探讨其可能的机制,为cSCC的ALA-PDT与药物联合治疗提供理论依据,也为其它难治性皮肤肿瘤的治疗开辟新思路。研究方法1、体外用不同浓度的阿维A,以及阿维A预处理后联合ALA-PDT处理SCL-1细胞株,光学显微镜下观察上述处理对细胞形态的影响。2、应用台盼蓝拒染实验检测阿维A处理后联合ALA-PDT处理SCL-1细胞后对细胞活性的影响。3、应用共聚焦显微镜法及流式细胞仪法检测不同浓度阿维A孵育SCL-1细胞,以及阿维A处理后联合ALA-PDT处理对细胞凋亡,以及ROS产生的影响。4、应用共聚焦显微镜法及流式细胞仪法检测不同浓度阿维A孵育SCL-1细胞后是否增加细胞膜的通透性。研究结果1、阿维A体外抑制SCL-1细胞生长,细胞变圆变小,甚至核固缩现象。这种影响在1.6×10-4mg/mL～1.6× 10-1mg/mL浓度范围内呈阿维A浓度依赖性。2、阿维A对SCL-1细胞的活性具有明显抑制作用,在6.4×10-4mg/mL～3.2×10-3 mg/mL浓度范围内呈浓度依赖性;阿维A明显增强ALA-PDT的抑制SCL-1细胞活性作用。3、阿维A对SCL-1细胞有促凋亡的作用,在1.28×10-4mg/mL～3.2×10-3mg/mL的浓度范围内呈浓度依赖性。阿维A明显增强ALA-PDT的促细胞凋亡作用。4、阿维A能促进SCL-1细胞产生ROS,在6.4×10-4mg/mL～3.2×10-3mg/mL浓度范围内呈浓度依赖性;阿维A能显著增强ALA-PDT促SCL-1细胞产生ROS的作用,这种作用在2.56×10-5mg/mL～3.2×10-3mg/mL范围内呈浓度依赖性。5、阿维A在1.6×10-3mg/mL以上的浓度能增加SCL-1细胞膜的通透性,在1.6× 1 04mg/mL～1.6× 10-2mg/mL的范围内呈浓度依赖性。研究结论1、阿维A在一定浓度范围内能影响SCL-1细胞的形态及生长,抑制细胞活性和促进细胞凋亡,这些作用具有阿维A浓度依赖性;阿维A预处理后联合ALA-PDT处理可增强ALA-PDT对SCL-1的上述作用。2、阿维A增强ALA-PDT对SCL-1的作用,可能与阿维A增加了 SCL-1细胞的通透性,导致ALA-PDT处理细胞时产生更多的ROS有关。
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