磁性氧化石墨烯基纳米药物载体的制备及其在癌症治疗中的应用研究

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目的:化学药物治疗作为癌症治疗最常见的手段之一,存在肿瘤靶向性差、治疗副作用严重、单一治疗效果差、肿瘤复发率和转移率高等缺陷。近年来,氧化石墨烯纳米材料在靶向药物递送和光热治疗方面的应用较为广泛。然而,氧化石墨烯在生理环境中容易聚集,且其被动靶向性不足以使高浓度的纳米药物载体富集在肿瘤组织中。因此,我们利用三甲酰基胆酸、叶酸和麦芽糊精聚合物对磁性氧化石墨烯进行修饰,构建了两种新型的磁性氧化石墨烯基纳米药物载体,用于靶向递送抗癌药物和化疗协同光热治疗癌症,减少药物治疗副作用,同时增强癌症治疗效果。方法:采用化学共沉淀法合成了磁性氧化石墨烯,再通过酰胺反应制备了叶酸接枝的麦芽糊精聚合物功能化的磁性氧化石墨烯(MGO-MDP-FA)和三甲酰基胆酸和叶酸功能化的磁性氧化石墨烯(MGO-TCA-FA)两种纳米药物载体。通过透射电镜、X射线衍射图、热重分析、傅里叶变换红外光谱和磁性能分析等对两种纳米药物载体的结构和形貌进行表征;利用红外热成像仪对其光热效应进行评价;将抗癌药物阿霉素(DOX)分别负载于MGO-MDP-FA和MGO-TCA-FA上合成纳米药物-载体复合物MGO-MDP-FA@DOX和MGO-TCA-FA@DOX,采用荧光光谱法研究了它们对DOX的药物负载和释放性能,还通过载药动力学和等温吸附探究其可能的药物吸附机制;通过溶血实验对其体外血液相容性进行了评价;通过荧光成像分析了MGO-MDP-FA@DOX对癌细胞的靶向性能以及MGO-TCA-FA@DOX靶向肝癌细胞的能力;通过CCK-8细胞毒性实验及细胞凋亡和坏死染色实验评价了MGO-MDP-FA@DOX和MGO-TCA-FA@DOX体外杀伤癌细胞的能力;借助实验动物模型对MGO-TCA-FA@DOX在体内抑制肝癌的效果进行了评价。结果:1.成功制备了具有优异的超顺磁性和较高的光热转换效率的MGO-MDP-FA纳米药物载体。MGO-MDP-FA主要通过化学吸附负载抗癌药物DOX,最大负载量达657.9 mg/g,且具有近红外光(NIR)响应性可控药物释放性能,在p H 5.3条件下,NIR照射下的DOX药物释放量是无NIR照射条件下的1.84倍。体外研究表明,MGO-MDP-FA@DOX具有良好的血液相容性、细胞相容性和癌细胞靶向性,且MGO-MDP-FA@DOX在近红外光照射下的癌细胞杀死率达80%,其癌细胞杀伤作用显著优于单一的化疗组(MGO-MDP-FA@DOX)和光热疗组(MGOMDP-FA+NIR)。2.成功合成了MGO-TCA-FA纳米药物载体,其具有良好的超顺磁性和优异的光热转换性能。载药实验表明,MGO-TCA-FA对抗癌药物DOX的负载作用以化学吸附为主,在DOX的初始浓度为0.4 mg/m L时,其载药量高达1040mg/g。释药实验表明,MGO-TCA-FA@DOX具有p H和NIR响应性可控药物释放性能,在40℃条件下,p H 5.3的释放率比p H 7.4高27.46%;在40℃和p H 5.3条件下,NIR照射下的DOX药物释放率增加了10.9%。体内外实验表明,MGO-TCAFA@DOX具有良好的生物相容性和肝癌细胞靶向性,在近红外光照射下具有较高的肝癌细胞杀伤率,且MGO-TCA-FA@DOX+NIR组的体内肝癌抑制率高达85%,明显优于单一的化疗组(MGO-TCA-FA@DOX)和光热疗组(MGO-TCAFA+NIR)。结论:1.本研究合成的MGO-MDP-FA纳米药物载体,具有较高的载药量、优异的光热转换效率、较好的生物相容性和NIR响应性药物释放性能,可结合被动靶向与叶酸的癌细胞主动靶向双靶向输送抗癌药物DOX,化疗协同光热疗的癌症抑制效果显著优于单一的治疗模式。因此,MGO-MDP-FA@DOX在癌症的治疗中具有潜在的应用价值。2.本研究合成的MGO-TCA-FA纳米药物载体,具有生物相容性好、载药量高、光热转换效率高、p H和NIR响应性可控药物释放性能等优点,可协同三甲酰基胆酸的肝细胞靶向、叶酸的癌细胞靶向和被动靶向,实现多重靶向递送抗癌药物DOX,在化疗与光热疗协同治疗肝癌方面具有良好的应用前景。
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