消毒剂(Neopredisan-135)对西氏贝蛔虫卵的体外杀灭效果观察及西氏贝蛔虫β微管蛋白基因的检测

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西氏贝蛔虫(Baylisascaris schroederi)是大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)寄生虫中最常见且危害较严重的寄生虫之一,野生和圈养大熊猫西氏贝蛔虫的感染率均很高。在圈养大熊猫的寄生虫防控中,目前主要采用驱虫药物进行驱虫,长期反复用药可能导致药物耐药性的产生,圈养环境中仍存在大熊猫西氏贝蛔虫的反复感染。为进一步搞好大熊猫蛔虫病的防控,本研究测定了消毒剂Neopredisan135-1对西氏贝蛔虫卵的体外杀灭效果,并对大熊猫西氏贝蛔虫耐药性相关基因β微管蛋白第198和200氨基酸位点进行检测,为大熊猫西氏贝蛔虫病的防控提供参考。1消毒剂(Neopredisan-135)对西氏贝蛔虫卵的体外杀灭效果观察本研究测定了消毒剂Neopredisan135-1对西氏贝蛔虫卵的体外杀灭效果,为圈养大熊猫西氏贝蛔虫的防控提供参考。将分离自大熊猫新鲜粪样中的西氏贝蛔虫卵通过消毒剂Neopredisan135-1不同浓度(0.25 ml·L-1、0.5 ml·L-1、1 ml·L-1、2 ml·L-1、4 ml·L-1)与不同时间(30 min、60 min、90 min、120 min)处理后,将处理后的蛔虫卵和未用消毒剂处理的平行对照组一并置于2.5%的重铬酸钾溶液中,在28℃温箱内进行培养,培养后在显微镜下观察虫卵的发育与死亡情况。发现0.25 ml·L-1浓度组处理蛔虫卵30min、60 min和90 min,其对蛔虫卵杀灭率均在50%左右;0.50 ml·L-1浓度组处理蛔虫卵30 min和60 min,其对蛔虫卵杀灭率在74.71%~87.64%;而在1 ml·L-1、2 ml·L-1、4 ml·L-1浓度下处理30 min其杀灭率均达到90%以上。1 ml·L-1、2 ml·L-1和4 ml·L-1的Neopredisan135-1对西氏贝蛔虫卵均具有较强的杀灭作用。考虑到成本、杀灭效果以及环境等因素,消毒剂Neopredisan135-1的推荐使用浓度为2 ml·L-1。2西氏贝蛔虫β微管蛋白基因的检测为了解大熊猫西氏贝蛔虫苯并咪唑类相关基因的耐药性情况。对收集自野生大熊猫与圈养大熊猫的西氏贝蛔虫用于I型β微管蛋白基因的PCR扩增,采用直接测序法进行β微管蛋白基因的遗传多样性分析。结果在第198(E198A)位点与第200(F200Y)位点没有发现位点突变。经过遗传多样性分析发现,西氏贝蛔虫八个种群中的单倍型多样性和核苷酸多样性水平相对较低,单倍型多样性(Hd)变化从0.04300到0.59048,核苷酸多样性(π)变化从0.00031到0.00563。八个种群间配对的FST值都相对偏高,从0.0027到0.7796,表明种群间存在分化程度,个别种群间基因流动不是很高。AMOVA显示有88.55%的遗传变异来自种群内部,不同地理位置对西氏贝蛔虫的种群结构有影响。研究结果表明:大熊猫西氏贝蛔虫苯并咪唑类耐药相关基因没有突变位点的产生。
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