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目的:对临床收集并放置于零下80摄氏度低温冰箱的不同级别的胶质瘤标本,取部分组织石蜡包埋并切片后进行免疫组化检测肿瘤标本MGMT甲基化情况,另取部分标本组织用组织DNA提取试剂盒提取全基因组DNA,采用巢式PCR对MGMT启动子基因甲基化进行扩增,以及变性高效液相色谱(DHPLC)检测并验证MGMT启动子甲基化存在情况。方法:第一部分:将人脑胶质瘤各个标本以及瘤周正常脑组织分别取部分组织进行免疫组化实验,观察肿瘤组织及瘤周正常组织的甲基化情况。第二部分:将人脑胶质瘤切取部分用于全基因组DNA提取,并采用巢式PCR对MGMT启动子基因甲基化进行扩增,后进行变性高效液相色谱(DHPLC)验证MGMT启动子甲基化情况以及采用甲基化特异性PCR进行胶质瘤标本甲基化检测。结果:1、分别对不同WHO分级的胶质瘤进行MGMT启动子基因甲基化检测,发现2例WHO I级胶质瘤有0例出现甲基化,WHO II级胶质瘤30例,检测出14例出现甲基化,甲基化比例为14/30即甲基化率为46.7%,WHO II-III级胶质瘤11例,检测出4例有存在甲基化,甲基化比例为4/11即甲基化率36.4%,WHO III级胶质瘤22例,检测出13例存在有甲基化,甲基化比例为13/22即甲基化率为59.1%,WHO IV级胶质瘤26例,检测出8例存在甲基化,甲基化比例为8/26,及甲基化率为30.8%。2、同时对该91例胶质瘤标本采用高效液相色谱(DHPLC)、甲基化特异性PCR检查甲基化情况以及进行免疫组化观察甲基化情况,三种方法检测的结果上存在一致性。结论:通过对不同级别的胶质瘤进行甲基化特异性PCR、免疫组化以及高效液相色谱(DHPLC)检查启动子MGMT甲基化情况,发现在较低级别的胶质瘤中存在MGMT甲基化发生频率较大,而在高级别的胶质瘤中MGMT甲基化的频率则相对要低一些,但无论是在低级别人脑胶质瘤还是在较高级别的人脑胶质瘤中都存在一定频率的MGMT启动子基因甲基化,这表明MGMT启动子基因甲基化是导致人脑胶质瘤发生的因素之一。