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目前免疫检测中所用的固相载体绝大部分都是由不可降解的高分子材料制备的。随着免疫检测项目的增多,载体用量也会快速增加,使用后载体材料的后续处理变得越来越麻烦。一方面会增加垃圾处理量,另一方面若处理不当会对环境造成污染,因此寻找一种可降解材料来制备免疫检测的载体具有十分重要的意义。本文以可完全降解的生物高分子材料聚(3-羟基丁酸戊酸酯)(PHBV)为原料,采用双重乳液法,将其制成微米级微球,并对PHBV微球制备工艺参数进行了优化;首次将PHBV微球用作免疫检测的载体材料,并以纤维连接蛋白(FN)为检测对象,建立了相应的FN免疫检测方法;为了简化微球免疫检测中复杂的洗涤过程,通过引入Fe3O4纳米粒子制备了磁性PHBV微球,并用于FN的免疫检测,成功地简化了洗涤过程,缩短了检测用时。在采用双重乳液法制备了 PHBV微球的研究中,通过显徽镜观察、扫描电镜测试、电导滴定法测羧基含量等手段对微球进行表征。考察了溶剂浓度、乳化剂浓度、乳化转速、油水相的比例等对微球制备的影响。综合考虑微球粒径、均匀度、分散性等因素,确定了制备PHBV微球的较优工艺条件为:初乳化转速为8000rpm,复乳化转速为1500rpm,PHBV浓度为5%w/v,PVA的浓度为1%w/v,W1/O的比例为1:10,(W1/O)/W2的比例为1:10;此条件下制备的微球粒径为5～15μm,分散性好,微球表面的羧基含量可达到3 mmol/g。以自制的PHBV微球为固相载体来检测FN,实验研究结果表明检测过程最佳参数为:微球用量4mg,效价比为1:32羊抗人FN抗体,酶标抗体的稀释倍数为2000。此时FN的检测下限为1 μg/ml,检测上限为100μg/ml。对待测血清和标准样品的FN浓度进行检测,结果表明PHBV微球作为载体的检测结果与酶标板的检测结果是一致的,但是酶标板的检测总用时要超过6.5 h,而微球检测总用时仅为3.5 h。由此可见PHBV微球可以用作免疫检测中的固相载体,并且可以明显缩短检测用时。为了进一步简化PHBV微球作载体时免疫检测中复杂的离心洗涤步骤,通过共沉淀法成功制备了共混型磁性PHBV微球,并将其用于FN的免疫检测。实验结果表明在Fe304纳米粒子的投入量为100mg,PVA浓度为3%w/v,反应时间为4h时,制备的磁性PHBV微球分散性好,磁性能强,表面羧基含量约为3.0 mmol/g,粒径在5～20 μm之间。将该磁性PHBV微球用于FN的免疫检测,其检测结果与PHBV微球和酶标板作载体时的检测结果一致,此时以磁分离洗涤代替离心洗涤使检测过程总用时缩短到3h。