背景及目的：³²P同位素敷贴是一种简易的皮肤短距离放射治疗方法，临床上较广泛使用于包括婴幼儿在内的群体，但其安全性一直存在争议。目前关于同位素敷贴治疗对机体损伤及影响的研究主要集中于成人，而对于幼龄群体者则相当匮乏；研究也多局限于敷贴局部组织，而对于机体远处组织脏器的研究却很少，对临床指导意义有限。为进一步研究³²P同位素敷贴在婴幼儿中使用的安全性，我们采用临床上³²P敷贴治疗的方法，建立SD幼鼠³²P敷贴模型，从外观及组织DNA损伤角度检测³²P敷贴对幼龄SD大鼠局部皮肤及远处组织、器官的损伤及影响。实验方法：1、动物模型的建立：参考临床方法，利用³²P溶液及滤纸，制作简易³²P敷贴器，贴敷于鼠龄6天的SD幼鼠背部皮肤。对照组使用生理盐水替代³²P溶液。2、Western Blotting方法检测DNA损伤应答蛋白ATM、H2AX、P53：采用不同活度（0μCi、5μCi、25μCi、125μCi），分别作用6h24h96h。提取靶器官组织总蛋白，使用western blotting检测局部皮肤、远处皮肤（距敷贴边缘0.5cm以外）及脾脏组织DNA损伤应答蛋白总体磷酸化水平，探讨敷贴对SD幼鼠局部及远处组织DNA损伤水平。3、彗星实验检测脾脏组织DNA损伤水平实验结果：1、³²P敷贴对局部皮肤及远处组织外观的影响（1）敷贴24h后，至中、大剂量可见局部皮肤随剂量增加颜色逐渐变红，甚至变苍白；（2）敷贴96h后观察半月，各剂量组局部皮毛生长明显受到抑制，并出现放射性皮炎，且呈现剂量依赖关系，对照组则未见损伤表现；（3）敷贴96h后观察1个月，各剂量组局部皮毛一定程度的恢复，但高剂量组后背变形仍存在，且部分实验鼠还出现会阴部溃烂、后肢瘫痪，死亡等并发症，对照组未见损伤表现；（4）高剂量组敷贴96h，次月重复一次，观察3个月后可见会阴溃烂更加明显，下肢瘫痪、活动受限，还可见部分鼠死亡。2、³²P敷贴对局部皮肤ATM、P53蛋白表达水平的影响：（1） ATM表达水平改变a)³²P敷贴各剂量组ATM、pATM表达水平均较对照组明显增高（P＜0.05）。b)各组ATM磷酸化比值（pATM/ATM）也均明显高于对照组（P＜0.01），并随剂量率增高而增高，呈现明显的剂量依赖性（P＜0.01）。（2） P53表达水平改变a)与对照组相比，各剂量组P53磷酸化比值（pP53/P53）均明显增高（P＜0.05）。b)作用6h后，P53磷酸化比值各剂量组间无统计学差异（P＞0.05）；作用24h后，在0-25μCi，呈现剂量依赖性（P＜0.01），继续增加至125μCi时反稍有下降；作用96h后，则呈现明显剂量依赖性（P＜0.01）。3、western blotting检测³²P敷贴对远处皮肤ATM的影响：a)与对照组相比，ATM、pATM表达水平均升高（P＜0.05）。b)敷贴6h后，ATM磷酸化比值在125μCi始明显增高（P＜0.05）；敷贴24h96h后，ATM磷酸化水平均较对照组明显升高（P＜0.01），且呈现明显的剂量依赖关系（P＜0.01）。4、³²P局部敷贴对SD幼鼠脾脏DNA损伤影响（1）彗星实验结果a)各剂量组OTM较生理盐水组均有不同程度的增高（P＜0.05）。b)敷贴6h24h后，在0-25μCi范围，OTM随着辐射剂量强度的增加而增加（P＜0.05）；在敷贴96h后，OTM随剂量增加呈现上升趋势。（2）Western blotting检测H2AX、P53改变a)与对照组相比，各剂量组P53、磷酸化P53,H2AX、磷酸化H2AX表达水平均明显升高（P＜0.05）。b)各剂量组H2AX磷酸化比值（pH2AX/H2AX）均明显高于对照组（P＜0.05），并随剂量增加呈上升趋势；敷贴96h后，最为显著（P＜0.01），且在0μCi-25μCi时呈现剂量依赖关系（P＜0.05），继续增至125μCi时反稍下降。c)除6h组5μCi， P53磷酸化比值（pP53/P53）明显高于对照组（P＜0.05），且96h随剂量升高而升高（P＜0.01）。结论：1、³²P敷贴不仅引起SD幼鼠敷贴局部皮肤DNA损伤，还引起远处皮肤及脾脏DNA的损伤：（1）³²P敷贴对SD幼鼠局部皮肤DNA的损伤，呈现放射强度（剂量率）依赖性，损伤程度随放射强度的增加而增加。（2）³²P敷贴对SD幼鼠远处皮肤DNA的损伤，也与剂量率的增加有关。（3）脾脏DNA损伤：在较低的剂量率及较短时间下，³²P敷贴即可引起SD幼鼠脾脏DNA的损伤；增加敷贴时间和剂量率，明显增加损伤严重程度。2、本实验提示，³²P敷贴治疗在临床上应谨慎使用，在婴幼儿等幼龄群体中其使用安全性尤其值得注意，应尽量避免采用大剂量率、长时间敷贴，以尽可能减少机体损伤。