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我国的油菜栽培品种包括白菜型油菜、芥菜型油菜和甘蓝型油菜。其中甘蓝型油菜因其具有强抗性、高产量及相对广泛的生态分布而成为我国的油菜主栽品种。近些年来,随着油菜产业领域逐步扩大,对油菜品质的要求也逐年升高。苗期活力对植株后期的生长发育有着基础性的作用,同时也对油菜品质的形成有着至关重要的影响。本研究以甘蓝型油菜为试验材料,通过生物信息学分析比对筛选候选油菜酰基辅酶A氧化酶同源基因,并且针对其读码框基因特异序列构建了CRISPR/Cas9基因编辑载体,并通过遗传转化获得了基因编辑转化体。然后通过基因编辑转化体与野生型油菜对比进行表型分析鉴定,以探究种子萌发期脂肪分解代谢途径的活性对糖合成以及油菜早期幼苗活力的影响。主要研究结果如下:1.以甘蓝型油菜“Westar”为材料,通过生物信息学分析预测了油菜基因组中的两个ACX同源基因,利用CRISPR/Cas9基因编辑系统成功构建两个单基因敲除载体Bna C04g28570D-Cas9和Bna A04g05950D-Cas9。2.用两个基因编辑载体分别进行了Westar油菜下胚轴转化,共得到了46株转化植株。经PCR及测序鉴定为阳性转化子的植株共18株,经鉴定最后获得8株针对Bna C04g28570D的基因编辑的遗传转化苗。同样针对Bna A04g05950D基因最终获得了10株基因敲除苗。3.由于种子数量差异,最终选取了14-1、14-7、14-14、14-15、15-5、15-12、15-25、15-33及野生型“Westar”作为对照测量了发芽后7d的苗期活力指标。结果显示,14-1、14-7、14-14、14-15、15-5、15-25及15-33在千粒重、发芽势与发芽率、下胚轴长、茎粗、叶面积、根长、鲜重、干重等苗期活力指标方面均与WT无明显差异。15-12株系在苗期活力指标方面均显著低于WT。4.对各转基因株系及野生型之间SPAD值进行测量发现基因编辑并未对SPAD产生明显影响。对各株系的可溶性糖含量及淀粉含量进行测定结果显示14-1、14-14、14-15及15-5基因编辑株系可溶性糖含量较高,14-1及14-15株系表现出较高的淀粉含量。5.综合3和4的苗期表型来看,14基因编辑株系的苗期活力指标较15基因编辑株系表现好且均与野生型无明显差异,初步分析认为基因编辑未对甘蓝型油菜幼苗造成负面影响。6.利用2,4-DB对不同基因编辑株系及野生型进行进一步表性差异检验,结果显示:14-1及15-33基因编辑株系均表现出较WT更高的耐药性,因此推断14-1及15-33基因编辑株系在β-氧化环节具有较低的2,4-DB代谢速率,进一步暗示Bna C04g28570D及Bna A04g05950D基因参与甘蓝型油菜生长发育所必需的β-氧化代谢途径。总的来看,Bna C04g28570D和Bna A04g05950D基因单独编辑不会对甘蓝型油菜幼苗表型产生影响,同时部分基因编辑株系表现出更高的可溶性糖和淀粉积累。Bna C04g28570D和Bna A04g05950D基因产物在β-氧化途经中发挥生物学功能。