猪囊尾蚴磷蛋白基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

被引量 : 7次 | 上传用户:yideng
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
猪囊虫病(Cysticercosis cellulosae)是由猪肉绦虫(Taenia solium)的幼虫-猪囊尾蚴(Cysticercus cellulosae)感染猪或人而引起的人畜共患寄生虫病,在我国及世界各地广泛流行,严重危害人体健康,并制约着养猪业的发展。通过寻找功能抗原基因,在体外进行表达可以解决其诊断和免疫抗原来源有限的难题。磷蛋白位于核糖体60S亚基上,亚基缺失和抑制实验证明,磷蛋白与蛋白质的合成密切相关。国外研究证明,猪囊虫磷蛋白能被囊虫病人血清所识别。本研究从猪囊尾蚴虫体中提取总RNA,进而通过oligo(dT)为探针分离mRNA,用GOLDKey软件设计磷蛋白特异性引物,通过RT—PCR扩增出一366bp的片段,扩增产物连接到PGEM—Teasy载体中,经酶切鉴定、PCR分析以及确证性测序后证明,所克隆的366bp的片段含P2蛋白基因完整的开放阅读框,其核苷酸序列和氨基酸序列与国外发表的P2基因的同源性分别为99.45%和98.36%。将重组质粒PGEM—P2和表达载体pProEX-HTb分别酶切后,亚克隆P2至原核表达载体pProEX-HTb中,通过酶切鉴定及PCR扩增筛选阳性克隆,用IPTG诱导表达,收集不同时间的菌液进行ELISA检测、SDS—PAGE电泳、Westernblot分析,结果表明,磷蛋白基因在大肠杆菌中成功表达,其表达产物为分子量15KD的融合蛋白,并能被猪囊虫阳性血清所识别。
其他文献
初生和断奶仔猪大肠杆菌性腹泻病的主要病原是肠毒素性大肠杆菌(ETEC)。ETEC的致病作用与其具有粘附性菌毛和产肠毒素密切相关,二者缺一不可。ETEC致病过程中重要的一个环节是
摘要:研究表明,听课后马上测试,学生一般能记住10分钟讲课内容的一半,如果48小时后测试,则只能记住其中的20%。如果我们把听课的内容加工整理成容易理解和记忆的课堂笔记。则恰恰可以弥补听过容易遗忘的不足。因此,记笔记是十分必要的。  关键词:笔记 板书听课内容 课外整理 位置       在我们的学生中,学生的课堂笔记往往记得很不规范。有的因为懒惰,书本上干干净净的;有的则非常勤快,记的东西比书本
采用各种组织细胞染色法和免疫细胞化学反应,通过光学显微镜和透射电镜技术,对鳖脑垂体和生殖腺的组织细胞构造进行系统观测,结果显示,鳖脑垂体的基本结构为 在光镜下远侧部细
伟大的爱因斯坦曾经说过:“兴趣是最好的老师,兴趣是学习动力的源泉”。兴趣对学好英语有着举足轻重的作用。如果教学得法,便可事半功倍。要取得这样的好效果,一个成功的英语教师应仔细研究教学方法,深钻教材,以活跃课堂气氛,提高课堂质量,并有意识地培养学生对英语的持久兴趣,因此趣味教学可以说是一种好方法,那么如何进行英语趣味教学呢?  一、和谐、融洽师生关系  教和学是一对矛盾,作为矛盾双方的代表教师和学生