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背景原发性肝癌是我国常见恶性肿瘤之一,其治疗以手术、放化疗、介入性治疗、分子靶向药物治疗和中医药治疗为主。近些年,随着新健脾理气方(简称XJPLQF)治疗肝癌在临床上广泛应用并取得良好效果,许多实验对新健脾理气方治疗肝癌的机理进行了多方探讨,研究结果显示新健脾理气方抑制肿瘤的有多重作用。许多研究表明了EGFR-STAT3信号传导通路参与肿瘤的形成。本研究从EGFR-STAT3信号通路的角度初步探讨了新健脾理气方治疗肝癌的机理,为临床应用提供了依据。目的本试验目的在于从动物实验入手,研究新健脾理气方对肝癌EGFR-STAT3言号通路的作用及新健脾理气方治疗肝癌的机理。方法建立皮下实体瘤动物模型,然后将造模后的小鼠随即分成5组：荷瘤模型组(模型组)、CTX阳性对照组(CTX组)、新健脾理气方低剂量组(XJPLQF氏剂量组)、新健脾理气方中剂量组(XJPLQF中剂量组)和新健脾理气方高剂量组(XJPLQF高剂量组),另外设正常空白对照组(正常组),共6组,每组10只昆明种小鼠。空白对照组和荷瘤模型组用生理盐水灌胃,CTX组用环磷氮芥腹腔注射,各中药组以低、中、高剂量的新健脾理气方中药灌胃。停药后24小时取材。观察新健脾理气方对H22肝癌小鼠肿瘤细胞形态学的影响；应用流式细胞术检测新健脾理气方对H22肝癌小鼠外周血T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+以及CD4+/CD8+的影响；应用免疫组化法检测H22肝癌小鼠肿瘤细胞FasL表达来判断新健脾理气方对肝癌小鼠肿瘤细胞免疫逃逸机制的影响,应用免疫组化法检测Bax、 Bcl-2表达判断新健脾理气方对H22肝癌小鼠肿瘤细胞凋亡相关基因蛋白表达的影响；应用免疫组化法检测EGFR、 TGF-α、 STAT3蛋白表达以及用原位杂交法检测H22肝癌小鼠肿瘤细胞的EGFR mRNA和STAT3mRNA表达,以判断新健脾理气方对EGFR-STAT3信号通路的影响。结果1.给药前各组小鼠体重无统计学差异(P>0.05)。给药第14天荷瘤模型组与各用药组及正常对照组的体重差异有统计学差异(P<0.05)。模型组体重大于其它用药组及正常对照组,提示模型组肿瘤不受抑制的生长,造成小鼠体重迅速增加的假象。抑瘤率比较发现,新健脾理气方各剂量组均有不同程度抑瘤作用,其中高剂量组效果较好。2.新健脾理气方各组的CD4+细胞值明显高于模型组(P<0.05),各组之间CD8+细胞值无统计学差异(P>0.05)；XJPLQF高剂量组的CD4+/CD8+比值明显高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。3.各组小鼠肿瘤组织FasL均有阳性表达。组间比较,XJPLQF中、高剂量组小鼠肿瘤组织FasL的表达明显低于模型组(P<0.05)。而其他各组之间的FasL表达无统计学差异(P>0.05)。4.免疫组化法结果表明,各实验用药组和模型组在bax基因蛋白表达方面存在差异,XJPLQF高剂量组和CTX组bax基因蛋白表达均高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。各实验用药组和模型组在bcl-2基因蛋白表达方面存在差异。XJPLQF高剂量组和CTX组bcl-2基因蛋白表达均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。5. EGFR-STAT3通路5.1免疫组化法：XJPLQF高剂量组及CTX组EGFR的染色阳性表达均低于模型组(P<0.05)。其余组之间EGFR染色阳性表达均无统计学差异(P>0.05)。XJPLQF高剂量组及CTX组TGF-α的染色阳性表达均低于模型组(P<0.05)。其余组之间TGF-α染色阳性表达均无统计学差异(P>0.05)。 XJPLQF高剂量组及CTX组STAT3的染色阳性表达均低于模型组(P<0.05)。其余组之间STAT3染色阳性表达均无统计学差异(P>0.05)。5.2原位杂交法：XJPLQF高剂量组及CTX组EGFR mRNA的阳性表达均低于模型组(P<0.05)。其余组之间EGFR mRNA阳性表达均无统计学差异(P>0.05)。XJPLQF高剂量组及CTX组STAT3mRNA的阳性表达均低于模型组(P<0.05)。其余组之间STAT3mRNA阳性表达均无统计学差异(P>0.05)。Spearman’s rho相关分析表明,EGFR mRNA与STAT3mRNA在H22肝癌小鼠肿瘤组织中的表现呈显著正相关(相关系数=0.530,P=-0.000)。结论1.新健脾理气方可能对H22肝癌小鼠肿瘤的生长的具有抑制作用。2.新健脾理气方可能具有改善机体的免疫功能状态,干预免疫逃逸的作用。3.新健脾理气方可能具有诱导H22肝癌小鼠肿瘤细胞凋亡的作用。4.新健脾理气方可能具有降低EGFR、 TGF-α(?)PSTAT3的表达,从而阻断EGFR-STAT3信号通路传导的作用。