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第一部分丙泊酚对新生大鼠海马pro BDNF/m BDNF表达比例的影响与学习记忆功能的关系目的通过向新生大鼠单次,多次注射丙泊酚,模拟单次与多次丙泊酚麻醉,探讨丙泊酚麻醉引起新生大鼠学习记忆功能障碍是否与其海马m BDNF及pro BDNF蛋白表达比例失衡有关。方法108只新生7 d健康清洁级SD大鼠,体质量12~16g.雌雄各半,按照随机数字表法分为3组:对照组(C组)、丙泊酚单次麻醉组(P1组)和丙泊酚多次麻醉组(P2组),每组36只。C组腹腔注射生理盐水7.5 ml/kg/d,连续7 d;P1组腹腔注射生理盐水7.5 ml/kg/d,连续6 d,第7天腹腔注射丙泊酚75 mg/kg;P2组腹腔注射丙泊酚75mg/kg/d,连续7 d。第7天各组大鼠分别注射完毕后间隔15min,每组随机取6只新生大鼠,心室穿刺采血,测定血糖及血气;于注射完毕后6h,24h,48h,72h每组随机抽取6只大鼠,分离海马组织。余下三组大鼠(n=6)喂养至出生第25天进行Morris水迷宫实验,测试空间学习记忆能力。水迷宫实验结束后(30 d)取大鼠海马组织。采用RT-PCR检测BDNF m RNA的表达,western blot法检测m BDNF,pro BDNF蛋白的表达,并计算出pro BDNF/m BDNF蛋白表达的比值。结果三组新生大鼠血气分析结果和血糖均在正常范围内,差异无统计学意义(P>0.05)。C组大鼠海马BDNF m RNA与m BDNF蛋白表达水平逐渐上调,pro BDNF蛋白表达水平与pro BDNF/m BDNF比值逐渐下调。与C组比较,P1组各时间点海马BDNF m RNA及m BDNF蛋白表达下调(P<0.05),pro BDNF/m BDNF比值升高(P<0.05),大鼠幼年期逃逸潜伏期延长,空间探索时间缩短(P<0.05);P2组各时间点海马BDNF m RNA及m BDNF蛋白表达显著下调,pro BDNF蛋白表达及pro BDNF/m BDNF比值显著升高(P<0.05),大鼠幼年期逃逸潜伏期显著延长,空间探索时间明显缩短(P<0.05)。结论丙泊酚单次麻醉可引起新生大鼠海马BDNF m RNA与m BDNF蛋白表达下调,而pro BDNF无显著改变,pro BDNF/m BDNF蛋白表达比值轻微上调,进而导致大鼠幼年期逃逸潜伏期延长,空间探索时间缩短;丙泊酚多次麻醉还可引起大鼠海马pro BDNF蛋白表达明显上调,pro BDNF/m BDNF蛋白表达比值则进一步升高,最终导致大鼠幼年期逃逸潜伏期明显延长,空间探索时间显著缩短。第二部分m BDNF/Akt/CREB和pro BDNF/Rho A信号传导失衡在丙泊酚致新生鼠认知功能障碍中的作用目的探讨m BDNF/Akt/CREB和pro BDNF/Rho A信号传导失衡在丙泊酚致新生鼠认知功能障碍的作用。方法新生7 d大鼠随机分为6组(n=12):C组连续7 d腹腔注射生理盐水;P1组注射生理盐水6 d后,第7天注射丙泊酚;P2组连续7 d注射丙泊酚;T、K及D组连续7d注射丙泊酚后,第7天再分别注射P75NTR受体抑制剂TAT-Pep5、Trk B受体抑制剂K252a与溶剂DMSO。各组随机抽取6只大鼠进行血糖血气的监测,其余大鼠喂养至第25天进行Morris水迷宫实验,测试空间学习记忆能力。水迷宫实验结束后取海马组织,通过Western blot检测m BDNF/Akt/CREB及pro BDNF/Rho A信号通路中蛋白的表达。结果六组新生大鼠血气分析结果各指标和血糖均在正常范围内,差异无统计学意义(P>0.05)。与C组比较,P1组与P2组大鼠幼年期逃逸潜伏期延长,空间探索时间缩短(P<0.05),且P2组改变更为显著。与溶剂对照组(D组)比较,Trk B受体抑制剂组(K组)大鼠幼年期逃逸潜伏期延长,空间探索时间缩短(P<0.05);P75NTR受体抑制剂组(T组)大鼠幼年期逃逸潜伏期缩短,空间探索时间延长(P<0.05)。与C组比较,P1组与P2组海马m BDNF/Akt/CREB表达下调(P<0.05),且P2组下调更为显著;P1组与P2组海马pro BDNF/Rho A表达上调(P<0.05),且P2组上调更为显著。与D组比较,K组海马Akt/CREB下调(P<0.05),T组海马Rho A下调(P<0.05)。结论丙泊酚导致新生大鼠幼年期学习记忆功能障碍与m BDNF/Akt/CREB抗凋亡信号通路抑制,pro BDNF/Rho A促凋亡信号通路增强有关。