【摘 要】
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铁蛋白（ferritin）是一种普遍存在的铁结合蛋白,在调节铁代谢平衡,抗氧化胁迫和抗病原物感染等方面具有重要的作用。家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus,BmNPV引发的血液型脓病对养蚕业造成了严重的危害。病毒的入侵和复制过程都需要铁的参与,因此研究铁蛋白与BmNPV之间的互作关系有助于进一步了解家蚕铁蛋白的相关功能,也期望对家蚕抗NP
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铁蛋白（ferritin）是一种普遍存在的铁结合蛋白,在调节铁代谢平衡,抗氧化胁迫和抗病原物感染等方面具有重要的作用。家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus,BmNPV引发的血液型脓病对养蚕业造成了严重的危害。病毒的入侵和复制过程都需要铁的参与,因此研究铁蛋白与BmNPV之间的互作关系有助于进一步了解家蚕铁蛋白的相关功能,也期望对家蚕抗NPV机制做出一定程度上的补充。本研究以Native-PAGE方法成功分离家蚕feritin复合体及其亚基,以RT-q PCR的方法分析家蚕铁蛋白的重链亚基（BmFerHCH）和轻链亚基（BmFerLCH）的时空表达及应答铁离子,细菌和BmNPV刺激的表达模式;在此基础上,结合SDS-PAGE、Western-blot和Far-western bolt技术在体外研究家蚕铁蛋白复合体及其亚基与BmNPV的互作关系。具体研究结果如下:1、成功分离出家蚕铁蛋白,证明其由两种不同类型的亚基组成的分子量约为670k Da的复合体。2、BmFerHCH和BmFerLCH广泛的分布于家蚕各个组织和不同发育时期中,且在血液和成虫期相对表达量最高。3、在血液和中肠中,BmFerHCH和BmFerLCH明显的表现出应答铁离子、金黄色葡萄球菌（S.aureus）、绿脓杆菌（P.aeruginosa）和BmNPV刺激的现象。4、BmFerHCH和BmFerLCH在感性品系P50添毒前后相对表达量没有显著变化,而在抗性品系BC9添毒后表达量下调。5、BmNPV可以与家蚕铁蛋白复合体有直接的相互作用,而与铁蛋白的单个亚基不能结合。6、构建BmFerHCH重组蛋白,获得了BmFerHCH多克隆抗体,并证明了BmFerHCH在头和血液中表达量较高,而在中肠和脂肪体中表达量较低。同时证明了BmFerHCH重组蛋白具有抗氧化的功能。综上所述,本研究首次从家蚕幼虫血液中分离出家蚕铁蛋白复合体并验证了铁蛋白复合体与BmNVP病毒的互作关系。这些结果为深入研究家蚕铁蛋白的相关功能和家蚕对病毒感染的免疫应答的分子机制提供参考。
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