现代药理研究表明,桑叶中多羟基生物碱具有明显的降血糖作用。而1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin,DNJ)作为多羟基生物碱的一种特征性成分,是桑叶能够治疗糖尿病的主要功效成分。本文以DNJ为研究对象,对其检测及提取分离技术进行了系统的研究。(1)建立了一种新的柱前衍生化HPLC检测桑叶中DNJ的方法。桑叶DNJ经0.05mol/LHCl水溶液提取后,采用6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯(AQC)试剂在pH=8.5的硼酸盐环境下柱前衍生,利用配荧光检测器的反相高效液相色谱进行测定。方法线性范围为0.5-25mg/L,检出限为0.02mg/L。平均回收率为97.4%。(2)通过正交实验确定了桑叶中DNJ和总黄酮的最佳提取工艺。最佳提取工艺为料液比为1∶10,乙醇浓度为60%(pH=2),提取时间为2h,提取温度为80℃,连续提取2次。DNJ的提取率为78.6%,提取液经真空干燥后得干粉中DNJ含量为0.24%。(3)使用AB-8大孔树脂和732H型阳离子树脂对桑叶中DNJ的分离纯化工艺进行了研究。使用AB-8大孔树脂对提取液进行脱色除杂处理后,采用732H型阳离子树脂交换层析法进一步纯化,采用分段洗脱方式对目标物质进行洗脱。分段洗脱流程为:1 BV去离子水——1.5 BV0.3 M氨水——2 BV0.5 M氨水,洗脱流速为2 BV/h,最终产品干粉中DNJ含量提高为到14.8%。