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本课题引入功能性的巯基识别物质结合荧光、电化学检测手段,研制了高灵敏、高特异性的检测含巯基的多肽、蛋白质以及DNA的生物传感器。具体的说,本论文的主要研究工作包括:（1）建立一种光谱型生物传感器,采用巯基特异性试剂N-（9-吖啶）马来酰亚胺（NAM）来检测表面固定的多肽以及DNA。作为模型体系,首先在烷基硫醇（MUA）自组装膜修饰的金电极表面固定还原型谷胱甘肽GSH,采用NAM标记GSH中的游离巯基生成具有荧光的衍生物,恒电位条件下脱附电极表面吸附物,检测脱附物在0.1mol·L-1KOH溶液中的荧光强度。GSH的检测限为40pmol·L-1。该方法可扩展到检测电极表面固定的六肽FT（含3个半胱氨酸残基）,脱附物的荧光强度约为GSH时的3倍,同FT与GSH中半胱氨酸残基的数量比相吻合。我们还采用该方法对表面固定的DNA进行了序列特异性分析,结果令人满意。该方法将电化学脱附与荧光检测相结合,具有灵敏度高、重现性好、样品用量少、快速准确等优点。（2）建立一种电化学生物传感器,采用双功能交联试剂N-（2-乙基-二茂铁）马来酰亚胺（Fc-Mi）检测表面固定的微量p53蛋白质。在金电极表面组装巯基化的单链ss-DNA探针/己硫醇（HT）混合自组装膜,随后单链ss-DNA探针与序列匹配的靶点DNA杂交。所形成的一致性双链DNA捕获溶液中的野生型p53蛋白质。利用Fc-Mi对p53分子表面的半胱氨酸残基衍生。p53与一致性双链DNA之间的特异性相互作用可通过检测二茂铁的电化学信号来指示。结果表明,碱基数目错配会大大影响双链DNA对野生型p53蛋白质的捕获。该方法可检测的p53最低浓度为1.33 nmol·L-1。上述生物传感器与采用溶液方法检测含巯基的多肽或蛋白质相比,具有灵敏度高、重现性好、样品用量少、快速准确等优点,为表面固定的生物分子的检测提供了有效的途径。