目的：三聚氰胺被认为是一种低毒的化工原料,动物长期摄入三聚氰胺会造成生殖、泌尿系统的损害,膀胱、肾部结石,并可进一步诱发膀胱癌。以往的研究主要集中在三聚氰胺对动物泌尿系统的损害方面,对生殖毒性研究方面目前国内外尚无系统报道。本实验通过建立孕鼠持续暴露于不同剂量的三聚氰胺染毒模型,研究：1.三聚氰胺暴露对孕鼠胎盘组织结构及仔鼠的影响。2.三聚氰胺暴露对孕鼠胎盘细胞凋亡调控基因Bax、Bc1-2蛋白表达的影响。初步探讨三聚氰胺暴露对孕鼠及仔鼠的毒性作用及其发生机制。方法：3月龄雌性Wistar大鼠48只,经适应性饲养并受孕后随机分为4组,每组12只。从妊娠第6天起每日上午8-9时灌胃染毒,按体重给药低、中、高剂量组分别为400mg/(kg·d)、800mg/(kg·d)、1200 mg/(kg·d),灌胃容量为lmL/0.3kg体重,连续染毒14天。正常对照组给予不含三聚氰胺的植物油。在妊娠第O、6、11、16、20天称体重,并按体重调整给药量。妊娠第20天戊巴比妥钠麻醉后剖腹取胎。1.取出子宫称取窝重,切开子宫检查有无吸收胎、死胎并计数着床数、活胎数、吸收胎数及死胎数。取出胎鼠,称取活胎重及胎盘重,量取活胎鼠身长、尾长。2.每只孕鼠随机选取2只胎鼠,取出完整胎肾置于10%甲醛中充分固定,石蜡包埋,光镜观察胎鼠肾脏组织结构的改变。3.剥离孕鼠胎盘,经甲醛固定、石蜡包埋切片,一部分经HE染色,观察其组织形态变化；其余切片采用免疫组织化学染色法检查胎盘组织细胞凋亡调控基因Bax、Bcl-2的蛋白表达情况。4.全部资料均采用SPSS13.0统计软件进行分析。组间比较采用多组单因素方差分析,实验数据以x±s表示。各种率的统计应用卡方检验。结果：1.对照组、低剂量组和中剂量组三组间仔鼠体重、身长及尾长比较,差异无统计学意义；高剂量组仔鼠体重、身长及尾长明显低于其他三组,与其他三组比较差异有统计学意义(P<0.05)。2.各组间胎盘重量比较差异无统计学意义。3.高剂量组窝重明显低于其他三组,差异有统计学意义(P<0.05)。与其他三组相比较,高剂量组的不良妊娠结局(死胎、吸收胎)增多、活胎数减少。受精卵着床数各组间比较差异无统计学意义。4.对照组和低剂量组仔鼠肾脏组织结构未见明显改变,中剂量组和高剂量组仔鼠肾脏中均出现结晶状物质,中剂量组仔鼠肾脏未观察到明显的组织病理改变,但高剂量组仔鼠肾脏出现炎性改变。5.胎盘组织形态学的改变5.1大体观察结果：对照组胎盘中央厚、边缘薄,呈暗红色,胎儿面由透明羊膜覆盖,表面光滑；低剂量组和中剂量组胎盘无明显改变；高剂量组的胎盘外观呈紫红色、无光泽,部分胎盘肿胀淤血,胎儿面羊膜混浊,光泽暗淡。5.2光镜观察结果：对照组基带、海绵带、迷路带结构清晰,滋养层细胞无明显增生,绒毛无肿胀；低剂量组胎盘结构未见明显改变；中剂量组海绵带滋养层细胞呈轻微退行性变,空泡化细胞增多,绒毛周围纤维蛋白沉淀不明显；高剂量组基带肿胀增厚,部分胎盘基带见灶状坏死以及少许淋巴细胞、单核细胞浸润,海绵带滋养层巨细胞增大,数目增多,空泡化细胞岛增多,迷路带血窦扩张淤血严重,海绵带及迷路带部分滋养层细胞呈退行性改变,绒毛肿胀增粗,绒毛间隙变窄,绒毛周围纤维蛋白沉积增多。6.胎盘组织Bax和Bcl-2的表达情况6.1 Bax基因和Bcl-2基因均主要表达于胎盘合体滋养层细胞,Bax在绒毛间质细胞及血管内皮细胞等处也可见表达,但Bc1-2在绒毛间质细胞及血管内皮细胞表达很少。Bax主要定位于胞浆和胞膜；Bcl-2主要定位于胞浆中,少数胞核也呈阳性。6.2胎盘组织中Bax的蛋白表达量四组间比较差异有统计学意义(F=17.42,P<0.01),染毒组胎盘组织中Bax的蛋白表达量比正常对照组明显增多,并且随着染毒剂量的增加Bax的表达量逐渐增多；胎盘组织中Bcl-2的蛋白表达量四组间比较差异有统计学意义(F=23.62,P<0.01),染毒组胎盘组织中Bcl-2的蛋白表达量比正常对照组明显降低,并且随着染毒剂量的增加Bcl-2的表达量逐渐减少；Bax/Bcl-2比值四组间比较差异有统计学意义(F=66.65,P<0.01)。结论：1.高剂量三聚氰胺暴露可引起仔鼠出现明显的中毒现象,表现为仔鼠的体重、身长、尾长及窝重明显降低,活胎数减少,死胎、吸收胎数增加,表明孕期暴露于高剂量的三聚氰胺可能会引起胚胎发育障碍和营养不良。2.妊娠期间长期暴露于高剂量的三聚氰胺,可能会通过胎盘作用于仔鼠肾脏组织,造成先天性的肾脏疾病。3.高剂量三聚氰胺暴露可引起胎盘组织炎性病变,对胎盘滋养细胞造成损伤,从而妨碍胎盘的血液供应及母胎间营养物质和氧气的交换,引起仔鼠宫内生长受限及其他生殖毒性。4.三聚氰胺可引起胎盘组织中Bax过度表达,Bcl-2表达减少,改变Bax/Bcl-2比值,使胎盘组织细胞的增殖和凋亡平衡紊乱,进而可能影响胎盘组织的物质转运及内分泌功能,对胚胎生长发育产生不良影响,这也可能是孕期三聚氰胺暴露致孕鼠生殖毒性和胚胎发育毒性的病理基础。