目的:本实验研究在中医病因学说理论指导下,模拟云南春燥环境因素并施加于实验小鼠,遵循以方测证的法则,采用治燥经典方桑杏汤、沙参麦冬汤、以及桑杏汤与沙参麦冬汤合方进行药物干预。在此基础上,根据中医“燥胜则干”、“燥邪伤人,首先犯肺”的临床特点,观察实验小鼠一般体征表现,并选择观察气管和肺组织形态的改变,以及检测实验小鼠气道免疫指标IgG、s IgA、SP-A、SP-D含量的变化。以期从功能、结构及分子三个层次,初步探讨云南春燥环境对小鼠的影响,为云南春燥证动物模型研制提供方法及客观指标。方法:将实验小鼠分为6组,正常组、模型组、阴性组、桑杏汤组、沙参麦冬汤组、合方组(即桑杏汤合沙参麦冬汤)。正常组小鼠置于人工气候箱内进行常温常湿环境干预,喂以正常饲料;模型组、阴性组、桑杏汤组、沙参麦冬汤组以及合方组5组小鼠,置于人工气候箱内进行春燥气候环境干预,并喂以香燥饲料,每组每日分别灌饮不同液体。其中,阴性组每日灌以白开水,桑杏汤组每日灌以桑杏汤,沙参麦冬汤组每日灌以沙参麦冬汤,合方组每日灌以桑杏汤与沙参麦冬汤的合方。每日观察各组小鼠一般体征,于第15天进行动物组织取材处理观察小鼠气管及肺组织形态、以及IgG、s IgA、SP-A、SP-D含量的变化。结果:1.实验小鼠一般体征的变化正常组小鼠,精神状态良好,尿液质清,大便质地正常,被毛色泽良好,有光泽;模型组小鼠与正常组相比,施加因素干预以后,逐渐出现,精神烦躁之象,常见打斗,尾部见抓痕血痕。体重减少,食量减少,饮水量波动较大。同时表现出爪甲干枯,尿色发黄,大便干硬,被毛槁枯,少量脱落等征象。与模型组相比,其余4组小鼠分别表现为:(1)阴性组表现为精神尚可,有爬盖现象,偶见打斗,饮食量大致相当,饮水量波动大,尿液色黄,大便质地和缓少许干燥,被毛仍干燥,未见脱落;(2)桑杏汤组表现为精神尚可,前期见打斗,后期未见,体重增加,饮食饮水量平稳,尿液清晰仅微黄,大便和缓略干燥,被毛仅略干燥;(3)沙参麦冬汤组表现为精神尚可,偶见打斗,体重增加,尿液微黄,大便正常,被毛少许干燥;(4)合方组表现为精神尚可,未见打斗,体重增加,饮食增加,尿色清,大便质软,被毛仅略干燥。2.实验小鼠气管、肺组织形态的变化正常组小鼠,气管形态规则,肺部支气管清晰,肺泡壁完整。模型组小鼠与正常组相比,气管黏膜层部分上皮细胞增生严重,部分损伤,脱落、变薄、缺失,黏膜层断裂不完整,部分纤毛损伤伴脱落,黏膜下层可见炎性细胞浸润。肺部支气管壁增厚,肺泡壁增厚,毛细血管扩张,部分肺泡壁肺间质充血瘀血,见红细胞、炎性细胞及肺大泡。与模型组相比,其余4组小鼠分别表现为:(1)阴性组,小鼠气管黏膜层部分上皮轻度增生,纤毛脱落,偶见炎性细胞,肺部仍见血管扩张,肺泡壁增厚,有炎性细胞,仅有少许肺大泡;(2)桑杏汤组,小鼠气管仅见纤毛少量脱落,肺部仅见支气管上皮些许脱落,肺泡壁些许增厚;(3)沙参麦冬汤组,小鼠气管黏膜层纤毛脱落,黏膜下层偶见炎性细胞,肺部支气管上皮轻度增生伴脱落,肺泡壁断裂,见少量红细胞和炎性细胞;(4)合方组,小鼠气管黏膜层部分轻度增生,黏膜下层仍可见炎性细胞,肺部仅见些许少部分支气管壁断裂,见少量红细胞。3.实验小鼠气道免疫指标的变化3.1小鼠气道IgG含量:与正常组相比,模型组小鼠气道IgG含量上升,但差异无统计学意义(P>0.05)。3.2小鼠气道sIgA含量:与正常组相比,模型组小鼠气道sIgA含量显著上升(P<0.01)。与模型组相比,阴性组与桑杏汤组小鼠气道sIgA含量极显著下降(P<0.001);沙参麦冬汤组与合方组小鼠气道sIgA含量下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.3小鼠气道SP-A含量:与正常组相比,模型组小鼠气道SP-A含量显著上升(P<0.01)。与模型组相比,阴性组与合方组小鼠气道SP-A含量均下降,但差异无统计学意义(P>0.05);桑杏汤组小鼠气道SP-A含量下降,差异具有统计学意义(P<0.05);沙参麦冬汤组小鼠气道SP-A含量上升,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.4小鼠气道SP-D含量:与正常组相比,模型组小鼠气道SP-D含量显著上升(P<0.01)。与模型组相比,阴性组、沙参麦冬汤组、合方组小鼠气道SP-D含量均下降,但差异无统计学意义(P>0.05);桑杏汤组小鼠气道SP-D含量下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.云南春燥环境下,小鼠一般体征、气管及肺组织形态都发生了相应改变,同时小鼠气道sIgA、SP-A以及SP-D含量也有上升趋势。说明云南春燥环境下,风、燥之邪侵袭小鼠,影响了小鼠的生理功能,从而表现出一系列干燥症状。同时,微观层面上,对小鼠肺及气管组织结构也造成一定程度的损伤,从而影响了小鼠气道免疫功能。2.治燥方剂干预下,各组实验小鼠的体征、气管及肺组织病变均有不同程度的改善。气道液sIgA、SP-A、SP-D也均有改善。根据方证对应原则,可初步判断本实验除去正常组外各组动物,基本符合燥证动物模型,即云南春燥证候模型。小鼠一般体征观察、气道组织病理形态观察、以及气道液sIgA、SP-A、SP-D含量可作为该模型的客观检测指标。3.桑杏汤组动物在多方面的改善优于沙参麦冬汤及合方组。提示云南春燥证外燥表现明显。这与前期临床研究所得出的,云南春燥证具有“外燥与内燥并存,外燥多于内燥”的结果相一致。