论文部分内容阅读
[目的] 探讨人胆汁中存在的一种具有沉淀特性的胆红素(BR)组分，分析单结合胆红素(MCB)对人胆汁成核时间(NT)和成核活性(NA)的影响。研究MCB的水难溶特性(溶解度)及其在病理性胆汁中参与胆固醇(CHO)结石及胆红素(BR)结石形成机制。 [方法] 收集胆囊切除术患者的胆囊胆汁和胆石。用于制备型高效液相色谱法(HPLC)分析技术胆汁来自胆道探查术病人。应用HPLC分析技术，再经分离、纯化及二次制备手段提取MCB。观察32例胆囊结石和10例非胆囊结石患者胆汁中分别加入不同浓度的MCB时NT和NA的变化。运用HPLC分析技术在不同温度、不同PH值条件下观察MCB溶解度并与其它型BR比较。 [结果] 经HPLC分析技术所得MCB纯度为80％左右。干燥的MCB纯品为棕褐色胶冻状物。不同浓度MCB作用于CHO结石患者胆汁时NT分别：4.71±0.98天、3.87±0.74天和2.53±0.76天；BR结石患者分别：8.34±1.63天、7.02±1.42天和6.20±1.71天；非结石患者分别为：7.95±1.56天、5.98±1.33天和5.07±1.27天。结石组分别与非结石组相比或两结石组间NT值比较，P＜0.05。MCB和MCB倍加两组NA最小值依次为0.7522和0.5371。PH7.9，温度37℃接近生理的条件下，MCB的溶解度(559.04+4.30 uM)仅为双结合胆红素(DCB)的1／6，比非结合胆红素(UCB)高约45倍。不同温度对各型BR的水溶性也有明显影响(P＜0.01)。MCB溶解度在PH7.9时最大，PH4.5时为0，并随PH值改变而呈曲线变化。 [结论] 在制备型HPLC单泵条件下用分析型HPLC寻找其BR组分洗脱分离最佳条件。制备出大量MCB纯品，同时检测出NT、溶解度，为进一步研究胆石形成提供物质条件。利用MCB同时观察CHO和BR结石的形成过程，为揭示胆石形成机理提供理论依据。