研究背景及目的:胃癌是世界高发恶性肿瘤之一，其发病率高、恶化快、转移早、预后差，根治性手术机会少，5年生存时间短。随着现代医学的不断发展，胃癌在手术、新辅助化疗等综合治疗下，5年生存时间得到一定的提高，但是仍然严重威胁着患者的生命健康及生活质量。因此，对胃癌发病机制的研究，并寻找早期诊断、疗效及预后评估的标记物是亟待解决的问题。微小RNA(microRNA，miRNA)由22～25个核苷酸构成的内源性丰富的单链非编码RNA，它通过抑制mRNA翻译和（或）促进mRNA降解来调控蛋白的表达。胃癌的发生、发展是个多步骤多因素的演变过程，大量的研究证实microRNAs的异常表达在其发生、发展中也起着一定的作用。RECK(reversion-inducing-cysteine-richprotein with kazal motifs)作为抑癌基因，最重要的作用是对基质金属蛋白酶(MMPs)的抑制作用，而且已经证实其与肿瘤转移及浸润相关。本次实验旨在系统研究miR-21在胃癌中的作用机制。　　材料方法:①采用昂飞人全基因组表达谱芯片检测胃癌细胞株AGS中miRNAs表达情况。②Cancer MicroRNAsArray检测胃癌细胞株AGS及组织中miRNAs表达情况。③采用TaqMan Real Time PCR方法进一步检测miR-21在40例健康人、48例慢性萎缩性胃炎患者、37例胃不典型增生患者及60例胃癌患者中表达水平，RECK/MMP2/MMP9/MMP14在60例胃癌组织及配对的癌旁正常组织中的表达倍数。④采用Wb(western blot)及免疫组化方法对RECK/MMP2/MMP9/MMP14在胃癌组织中的蛋白表达水平检测。应用细胞转染方法，探讨miR-21的可能作用机制。⑤采用TaqMan Real Time PCR方法检测40例健康人、48例慢性萎缩性胃炎患者、37例胃不典型增生患者及60例胃癌患者外周血中miR-21的表达水平。　　结果:①miR-21在两种芯片中呈高表达;②组织验证结果显示miR-21在60例胃癌组织中呈现高表达，miR-21高表达与淋巴浸润、静脉侵犯、T、N及临床分期有关，P均＜0.05。miR-21在健康人胃组织中、慢性萎缩性胃炎组织中及不典型增生患者胃组织中的表达倍数低于胃癌患者组织内的表达倍数;miR-21在早期胃癌中的表达倍数要低于晚期胃癌组织中的表达倍数。随着病变程度的不断加深，miR-21的表达倍数也在不断的升高，尤其是在胃癌的晚期。miR-21的高表达对胃癌患者的生存预后也产生一定的作用。无论在早期还是晚期胃癌组织中，在有无淋巴结转移的胃癌组织中，RECK的mRNA水平均较MMP2/MMP9/MMP14的mRNA水平低。③Wb实验结果可以看出RECK/MMP2/MMP9/MMP14蛋白在癌组织中的蛋白水平高于癌旁正常组织中的蛋白水平。60例胃癌组织RECK/MMP2/MMP9/MMP14免疫组化结果，RECK在胃癌组织中阴性及弱阳性率分别为98.3％、1.67％，强阳性率为0，而在癌旁正常组织中的阴性及弱阳性率分别为0、3.30％，强阳性率为96.7％。MMP2在胃癌组织中的阳性表达率高于其在癌旁正常组织中的表达率（80％ vs63.3％，P＜0.01），MMP9在胃癌组织中的阳性表达率高于其在癌旁正常组织中的表达率(95％ vs46.7％，P=0.022)，MMP14在胃癌组织中的阳性表达率高于其在癌旁正常组织中的表达率(73.3％ vs63.3％，P＜0.01)。RECK在60例胃癌患者中的表达率与肿瘤大小、静脉侵犯、淋巴浸润、T、N及临床分期有显著关系，P值均＜0.05。MMP2的表达率仅仅与静脉侵犯相关，P值为0.035。MMP9的表达率与与分化程度、静脉侵犯、淋巴浸润相关，P值均＜0.05，与T、N及临床分期显著相关，P值均＜0.001。MMP14的表达率与淋巴浸润、N及临床分期显著相关，P值均＜0.05。④细胞功能实结果可知，miR-21对胃癌细胞的增殖、迁移、侵袭产生重要的作用，Wb结果指出miR-21的高表达下调RECK，而RECK的低表达使MMP2/MMP9/MMP14表达上调。⑤miR-21在胃癌患者外周血中的表达倍数显著高于健康者、慢性萎缩性胃炎患者及不典型增生患者;且Ⅲ期胃癌患者外周血中miR-21表达倍数高于Ⅰ/Ⅱ期患者外周血中的表达倍数。外周血中miR-21的高表达与淋巴浸润、静脉侵犯、T、N及临床分期相关，P值均＜0.001。　　结论:miR-21在胃癌中呈过表达，miR-21的高表达下调RECK，而RECK的低表达又使MMP2/MMP9/MMP14表达升高，尤以对MMP9的作用最明显。由此说明它们的异常表达及相互作用在胃癌的发生机制中发挥着一定的作用。miR-21在胃癌患者外周血中呈高表达，提示miR-21可以作为检测胃癌的一个临床筛选的肿瘤标志物。