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药典中记载蜂胶(propolis)具有抗消渴症的功效,结合这种功效,发现蜂胶中的有效活性成分咖啡酸苯乙酯(CAPE)的儿茶酚结构具有抗氧化作用,由于胰岛β细胞自身所分泌的抗氧化酶水平极低,浓度过高的氧化自由基可引起胰岛β细胞功能障碍,削弱胰岛素的作用。研究表明,Nuclearfactor erythriod2-related factor2(Nrf2通路)对于胰岛β细胞具有保护作用,能够诱导抗氧化酶的表达,最大限度的保证Ⅱ型糖尿病患者的胰岛β细胞的分泌功能。而足够的证据已经表明,抗氧化已经成为一个全新的糖尿病靶点,而咖啡酸苯乙酯又是Nrf2通路的激动剂,因此,咖啡酸苯乙酯是一个潜在的Ⅱ型糖尿病的治疗药物。 蜂胶中活性成分咖啡酸苯乙酯的提取工艺:取粉碎成20目的蜂胶109,加入1OOmL氯仿-甲醇(20∶1)混合溶剂溶解,超声提取(温度60℃、频率70KHz)40min,将蜂胶提取液离心(5000r/min)10min,取超声提取物离心后清液加2mol/L盐酸溶液调节pH至3,减压浓缩,至稠膏状,回收氯仿-甲醇相。向浓缩的浸膏中加入蒸馏水(除去浸膏中水溶性杂质),分别加入1OOmL石油醚萃取3次,合并石油醚相,离心(5000r/min)10min,取清液用旋转蒸发仪蒸干,回收石油醚相,得到半成品。用200~400目的硅胶进行柱层析,进一步除去半成品中的杂质,最后采用制备液相进行纯化得到纯度为80.6%的咖啡酸苯乙酯。 Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立是先喂养高脂高糖饲料(饲料喂本实验自制,主要配料有猪油、鸡蛋等组成),后用链脲佐菌素50mg/kg、30mg/kg连续损伤成模,通过对血清中各项酶学生化指标的检测,初步推断出咖啡酸苯乙酯对Ⅱ型糖尿病有效,进一步研究发现,糖尿病大鼠的氧化指标会比空白组大鼠的氧化指标高,而抗氧化酶含量会降低,咖啡酸苯乙酯有效的抑制了氧化指标的升高,同时提高了抗氧化酶的分泌。因此,在本实验条件下,咖啡酸苯乙酯通过清除体内自由基以达到其抗氧化的作用,可能具有治疗Ⅱ型糖尿病的功效。