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目的:以肠道黏膜屏障为切入点,对针刺联合点穴减缓肠道损伤,治疗T2DM的作用机制进行研究。首先通过循证医学角度评价手法临床应用的证据,其次通过临床观察进一步证实针刺联合点穴改善T2DM患者糖脂代谢紊乱的临床疗效,最后通过动物实验进一步明确针刺联合点穴通过肠道菌群介导的局部免疫炎症和肠道黏膜屏障损伤,探究针刺联合点穴对T2DM肠道渗漏的效应以及作用靶点。多角度,多途径为针刺联合点穴在临床治疗T2DM的合理运用提供理论依据和证据参考。方法:第一章针刺联合推拿改善T2DM患者血糖变化及疗效的系统评价和Meta分析检索CNKI、万方、VIP、Pub Med、Embase、Cochrane中英文数据库,纳入符合标准的随机对照研究,提取研究数据,并对空腹血糖（FPG）、餐后2小时血糖（2h PG）、糖化血红蛋白（Hb A1c）等结局指标进行合并分析,对针刺联合推拿作为补充疗法治疗T2DM做出评价,同时总结纳入研究的穴位处方及推拿手法。第二章针刺联合点穴治疗T2DM患者代谢紊乱及疗效的临床观察本研究采用随机对照实验,纳入符合标准的T2DM患者79例,随机分配到干预组（针刺联合点穴结合基础药物）和对照组（基础药物）,两组患者分别为39例,40例。手法干预每日一次,每周休息2天,共干预6周,观察两组患者治疗前后的FPG、2h PG、Hb A1c等血糖及血脂相关指标以及中医症状量化积分的变化,评价针刺联合点穴改善T2DM症状及临床疗效的作用。第三章针刺联合点穴对T2DM大鼠糖脂代谢及胰岛素水平的影响本研究通过高脂饮食联合STZ诱导建立T2DM大鼠模型。将造模成功的T2DM大鼠分为MOD组（模型组）,DMBG组（阳性药物组）,ACU组（针刺组）及AM组（针刺联合点穴组）,另设普通饮食的正常SD大鼠为CON组（空白组）。通过观察各组大鼠一般情况、体重等方面评估大鼠整体状态;通过检测FPG及空腹胰岛素水平,计算胰岛素抵抗稳态模型指数;通过检测葡萄糖耐量试验（OGTT）、FPG及血脂相关指标,评估针刺联合点穴对T2DM大鼠的葡萄糖代谢和脂质代谢功能的情况。第四章针刺联合点穴对T2DM大鼠肠道菌群结构及稳态的影响通过16S r DNA测序,分析CON组、MOD组、ACU组以及AM组大鼠菌群结构。通过α多样性和β多样性,分析针刺联合点穴对大鼠肠道中微生物群体的多样性、丰富度及群体结构的影响;通过对各组门属物种的生物差异,观察各组菌群种类变化;通过分析菌群变化对功能影响的预测,探索针刺联合点穴对肠道菌群结构稳态的影响,分析手法影响的差异菌属对代谢功能的作用。第五章基于TLR4/MyD88/NF-κB探讨针刺联合点穴保护T2DM肠道黏膜屏障的作用机制应用HE染色观察结肠组织的形态学变化;应用ELISA法检测外周血中LPS及炎性细胞因子IL-4、IL-1β、TNF-α水平;应用Western blot法检测结肠紧密连接蛋白Claudin1、ZO-1、Occludin的蛋白表达水平,以及TLR4、MyD88、NF-κBp65的蛋白表达水平;应用q PCR法检测结肠中LBP、CD14以及TLR4/MyD88/NF-κB通路下游相关炎症因子TNF-α、IL-βm RNA水平。探究手法发挥肠道保护的作用,探索针刺联合点穴修复T2DM肠黏膜损伤,发挥治疗T2DM作用的分子机制。结果:第一章针刺联合推拿改善T2DM患者血糖变化及疗效的系统评价和Meta分析在改善TG水平及临床总有效率方面,针刺联合推拿与常规治疗相比效果相似;但与纠正生活方式和药物治疗相比,针刺联合推拿作为补充疗法能够更好的改善T2DM患者FPG、2h PG、Hb A1c、TC及LDL-C水平。总结纳入研究中的穴位处方及手法发现,高频穴位为足三里穴、脾俞穴、中脘穴。常用手法为点按法、摩腹法、按揉法。第二章针刺联合点穴治疗T2DM患者代谢紊乱及疗效的临床观察（1）通过对比两组患者治疗后的血糖变化情况,针刺联合点穴下调T2DM患者的FPG、2h PG、Hb A1c水平的能力更佳。（2）对比两组患者治疗后相关血脂水平异常情况均较有好转;其中针刺联合点穴在改善TG和LDL-C水平的方面较好于对照组,但对TC的调节两组不具有差异。（3）使用针刺联合点穴补充治疗能显著改善患者中医症状,特别是胃肠方面的不适症状。（4）治疗6周后,干预组总有效率88.89%;对照组总有效率85%,可见针刺联合点穴补充治疗效果优于药物治疗。第三章针刺联合点穴对T2DM大鼠糖脂代谢及胰岛素水平的影响（1）干预结束后,各组大鼠血糖均显著低于MOD组;针刺联合点穴显著下降模型大鼠GSP水平,改善Hb A1c异常状态,但无统计意义;OGTT结果显示,针刺联合点穴使T2DM大鼠在各时间点血糖及浓度-时间曲线下面积（AUC）明显下降（2）与MOD组相比,ACU组及AM组血清中FINS、HOMA-IR均水平呈现下降趋势。（3）与MOD组相比,针刺联合点穴显著缓解了T2DM大鼠血清中TG和LDL-C异常水平。第四章针刺联合点穴对T2DM大鼠肠道菌群结构及稳态的影响（1）针刺联合点穴可以丰富T2DM大鼠肠道菌群的多样性,提高菌群物种均匀度。（2）针刺联合点穴能够富集T2DM大鼠菌群中产粪甾醇真细菌、毛螺菌科NK4A136组,Duncaniella菌属等与肠道黏膜屏障相关菌属的相对丰度,提高菌群中产生短链脂肪酸的有益菌丰度。（3）功能预测分析发现针刺联合点穴能够影响肠道菌群抑制步CMP-KDO生物合成途径Ⅰ的活性,该途径是催化合成LPS的第一步。第五章基于TLR4/MyD88/NFκBp65探讨针刺联合点穴保护T2DM肠道黏膜屏障的作用机制（1）病理结果提示,针刺联合点穴能较好地改善T2DM大鼠肠黏膜上皮结构破坏情况,缓解炎性细胞浸润程度。（2）针刺联合点穴能够调节,模型大鼠外周血中LPS及炎性细胞因子IL-4、IL-1β、TNF-α水平异常情况（3）针刺联合点穴显著上调了T2DM大鼠结肠中紧密连接蛋白ZO-1及Occludin的蛋白表达水平,对于Claudin1蛋白也起上调作用,但结果不显著。（4）针刺联合点穴能够抑制肠组织中TLR4、MyD88、NF-κBp65蛋白表达,对于上下游细胞因子LBP,CD14、IL-1β、TNF-αm RNA水平也起到了抑制作用。结论:（1）通过循证医学角度,证实针刺联合推拿在改善T2DM患者血糖血脂情况具有一定优势,但未来仍需更多深入探讨的疗效观察。（2）临床基础治疗前提下,使用针刺联合点穴干预,能更好的帮助患者恢复健康血糖和血脂水平状态。同时,有效减轻T2DM患者胃肠方面的不适症状。（3）针刺联合点穴能够调节肠道微生物稳态及结构,修复肠道黏膜屏障损伤,通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路活性,缓解局部及全身免疫炎症系统,改善糖脂代谢紊乱状态,减轻T2DM带来的肠道损伤,提示其作用靶点可能在肠道。