NF-кB信号通路在诱导骨髓间充质干细胞向肝样细胞分化中的表达

来源 :青岛大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hellson
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:研究nuclear factor-kappa B(NF-кB)信号通路在肝细胞生长因子(HGF)、β-神经生长因子(β-NGF)、肝组织液介导下髓间充质干细胞向肝样细胞定向分化的作用。  方法:全骨髓贴壁法分离大鼠骨髓间充质干细胞,使用10%胎牛血清的DMEM低糖培养液进行培养,将传至第三代的髓间充质干细胞分成8组:诱导对照组,HGF诱导组,β-NGF诱导组,肝组织液(LTF)诱导组,抑制对照组,HGF抑制诱导组,β-NGF抑制诱导组,肝组织液(LTF)抑制诱导组。分别加入等量含血清培养液,HGF,β-NGF,肝组织液诱导剂,BAY11-7082(NF-кB抑制剂),HGF和BAY11-7082,β-NGF和BAY11-7082,肝组织液诱导剂和 BAY11-7082。20天后进行吲哚靛青绿(ICG)摄取检测已分化的肝细胞,免疫荧光染色检测NF-кB,蛋白质印迹检测NF-кB和AAT的表达。  结果:HGF诱导组、β-NGF诱导组和肝组织液(LTF)诱导组中出现分化成圆形的肝细胞,可以摄取ICG,免疫印迹检测显示alpha-1-antitrypsin(AAT)表达,并且免疫荧光检测显示NF-кB已被激活移位至胞核,而HGF抑制诱导组,β-NGF抑制诱导组,肝组织液(LTF)抑制诱导组吲哚靛青绿阳性率和AAT表达量显著性降低,免疫荧光检测和免疫印迹检测结果显示NF-кB阳性率和表达量分别对比HGF诱导组,β-NGF诱导组和肝组织液(LTF)诱导组也显著性降低。  结论:HGF、β-NGF、肝组织液诱导骨髓间充质干细胞后,其分化细胞可表达AAT且能摄取吲哚靛青绿,具备终末分化肝细胞的基本特征;干细胞向肝样细胞的定向分化过程中伴有NF-кB信号的激活。
其他文献
我们用胶质细胞特异性的抗体Vimentin和GFAP对出生后不同年龄阶段小鼠视网膜进行免疫荧光化学染色来研究出生后小鼠视网膜Muller胶质细胞的发育情况。结果发现小鼠视网膜Mull
糖尿病状态下,心肌细胞中异常的钙离子代谢是诱发糖尿病心脏病的重要机制之一,而细胞内的钙代谢又受多种蛋白的调控我们称之为钙调控蛋白,钙调控蛋白涉及很多种,其中较为重要
本研究选用中国水产科学研究院黄海水产研究所培育的"壬海1号"凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)新品种,利用单因子浓度梯度法,通过在基础饲料中添加不同质量分数的聚β-羟基
目的研究管花肉苁蓉的化学成分阿克替苷对大鼠实验性前列腺增生模型的抑制作用及其机理。方法①去势大鼠皮下注射丙酸睾酮建立良性前列腺增生模型,阿克替苷(60、30、15mg·kg-1·d-1)灌胃6周。末次给药后分离前列腺,称重并计算前列腺指数;取腺体制作石蜡切片,光学显微镜观察前列腺细胞结构并计数相同倍数下腺体数目;②石蜡切片应用免疫组织化学方法检测雄激素受体(AR)和转化生长因子Ⅰ型受体(TGF-β
本研究以黑腹果蝇作为模式生物,拟通过杂交和同源重组等遗传学方法,建立基于细胞凋亡作用的抗肿瘤药物筛选模型。实验中采用已有的绿色荧光蛋白(GFP)标记的FLP/FRT重组体系(T1)和scrib/TM6B平衡株系(T2)进行杂交,获得眼部器官芽表型带有GFP-scrib-/-的嵌合体肿瘤发生模型,表现为成虫个体眼部组织异常增生,荧光显微观察(激发光波长450-490 nm)、电泳结果和western
蛋白质的结构与功能信息对于探索生命奥秘,研发新药具有重大的科学意义,而结构决定功能。X-射线衍射技术作为最主要的技术解析了蛋白质数据库中88%的结构,而获得高质量单晶一直是
1β-酪啡肽-7的制备(分离、纯化与鉴定)目的探讨酪蛋白酶解产生β-酪啡肽-7(β-CM-7)的最适条件;建立酶解产物的分离及其鉴定β-CM-7的方法。方法将酪蛋白酶解,其酶解产物经